[发明专利]一种细胞迁移实验用的装置有效
申请号: | 201410206458.2 | 申请日: | 2014-05-15 |
公开(公告)号: | CN103952291A | 公开(公告)日: | 2014-07-30 |
发明(设计)人: | 曹莉莉;宋艳;王亮;孔歉歉;吴广萍;杜娟;郑盈盈;郑亚冰 | 申请(专利权)人: | 山东省千佛山医院 |
主分类号: | C12M1/00 | 分类号: | C12M1/00 |
代理公司: | 济南诚智商标专利事务所有限公司 37105 | 代理人: | 王汝银 |
地址: | 250014 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细胞 迁移 实验 装置 | ||
技术领域
本发明涉及一种实验室用器具,具体地说是一种细胞迁移实验用的装置。
背景技术
细胞迁移在人体的正常生理活动和疾病发生中普遍存在,例如细胞的觅食、伤口损伤愈合、胚胎发生、神经系统形成、免疫反应、癌症转移等很多事件都涉及到细胞迁移。细胞迁移是当前生命科学研究的一个重要方向和热点,科学家们试图通过对细胞迁移的研究,在血管损伤修复、阻止癌症转移、植皮等医学应用方面取得更大成果。
目前研究细胞迁移主要用划痕实验。上皮细胞、角质细胞等在生理状态下形成单层或者复层上皮,在创伤愈合等病理状态下,细胞发生迁移,以侧向的运动为主。划痕实验很好地模拟了这种运动形式,并且操作方便,因此是研究细胞迁移的一个很好的模型。在现行的划痕实验中,一般采用无菌的塑料枪头人工手划,如图1所示,可见划痕边缘不整齐,划痕中有PBS清洗后残留的细胞,不同孔中划痕面积不同,这些都会影响实验效果及结果的判断,因此此种方法具有划痕不直、划痕位置不准确、划痕面积不统一等问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种细胞迁移实验用的装置,可以方便快速的进行划痕,且划痕整齐大小一致,板体底部有栅格刻度线,便于观察及计算相对划痕面积。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:一种细胞迁移实验用的 装置,其特征是,包括板体和均匀分布在板体上的孔,孔设置为方形,在孔底部的外侧设有栅格,栅格的中心线与孔的中轴线重合,在孔底部的内侧贴有分隔条,粘合的材料为医用高分子粘合剂,分隔条纵向中心线与栅格的中心线重合,所述分隔条的宽度为1mm,长度大于孔长度,在分隔条的一端设有拿持部。
所述的栅格间距为0.25mm。
所述的分隔条的拿持部位于孔外且不高于板盖,且末端设有拉环。
所述的分隔条为材质超薄透明塑料胶条。
本发明的有益效果是:通过设计为方形孔,划痕的面积为长方形,与圆形孔相比面积计算更加精确;通过在孔内贴有带拉环的分隔条,可在划痕实验时,揭下分隔条,即可得到大小一致规格整齐的划痕,且方便快速;通过在孔底部设有栅格,可方便观测统计细胞移动的位置,计算相对划痕面积。
附图说明
图1是普通实验中人工划痕后的边缘状态示意图,
图2是本发明的结构示意图,
图3是孔底面仰视图,
图4是孔底面俯视图,
图5是图4的A-A视图,
图6是揭下分隔条后的边缘状态示意图。
图中:1板体,2孔,3分隔条,31拿持部,32拉环,4栅格。
具体实施方式
一种细胞迁移实验用的装置,包括板体1和均匀分布在板体1上的孔2,孔2设置为方形。可根据需求确定需要的孔的数量,在孔2底部的外侧设有栅格4,栅格间距为0.25mm,栅格4的中心线与孔2的中轴线重合。在孔2底部的内侧贴有分隔条3为材质超薄透明塑料胶条,粘合的材料为医用高分子粘合剂,无 细胞毒性,去除分隔条3后孔2底部无残留,不影响细胞生长。分隔条3纵向中心线与栅格4的中心线重合,这样当分隔条3揭下后,分隔条3两侧的细胞相对于栅格4中心线的距离是相同的,便于数据统计。所述分隔条3的宽度为1mm,长度大于方形孔长度,这样可避免圆形孔边缘有部分细胞未分割开而导致的划痕面积计算不准确问题。在分隔条3的一端设有拿持部31,拿持部位于孔外且不高于板盖,拿持部31高于孔2边缘部分设有拉环32,便于工作人员拿镊子夹持制作划痕。
实验步骤:
1.细胞培养
以人肝癌细胞系BEL-7402为例,肿瘤细胞在RPMI1640培养基(含10%FBS,100U/ml青霉素,100ug/ml链霉素)、37℃、5%CO2条件下培养,待细胞达到90%融合度时消化细胞进行计数。
(1)75%酒精擦拭超净台台面,依次摆好操作所需要的塑料吸管、培养瓶等,紫外线照射30min后使用;PBS磷酸盐缓冲液、RPMI1640完全培养液及0.25%胰酶置于37℃温箱中预温,酒精擦拭后放入超净台;
(2)戴好无菌无粉手套,取出培养瓶置于倒置相差显微镜下观察细胞生长状态,待细胞生长至大约90%融合度时即可消化细胞进行计数;
(3)吸管吸弃旧培养液,用PBS缓冲液冲洗2遍,加入适量胰酶,胰酶的量以刚好覆盖细胞即可,必要时放在37℃温箱中孵育;
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