[发明专利]一种抗ROS氧化胁迫高效分泌表达外源蛋白的基因工程菌及其构建方法

权利要求书

1.一种抗ROS氧化胁迫高效分泌表达外源蛋白的基因工程菌及其构建方法，所构建的菌株在抗ROS氧化胁迫能力上有明显提升。将外源基因导入该基因工程菌中，有利于菌株高效表达蛋白质。

2.根据权利要求1所述的抗ROS氧化胁迫的基因工程菌，其特征在于，所用的抗ROS氧化胁迫基因为毕赤酵母自带的mpr1基因，将此基因过表达以提高细胞抗ROS氧化胁迫功能，mpr1基因序列的NCBI登陆号为8198718，基因序列如SEQ ID No1所示。

3.根据权利要求2所述重组基因工程菌，其特征在于，所用于过表达的载体为pPICZ系列或者pPIC3.5系列，所用的菌株为P.pastoris。构建重组菌步骤如下：

1)提取毕赤酵母基因组，并以此为模板，PCR扩增获得mpr1基因；

2)构建含mpr1基因的重组质粒，转化至E.coli JM109中扩增；

3)将重组质粒经酶切线性化后电转至P.pastoris中，于抗性平板上挑选转化子。