[发明专利]一种7-去氢胆固醇的分离纯化方法有效
申请号: | 201410210759.2 | 申请日: | 2014-05-19 |
公开(公告)号: | CN104017042A | 公开(公告)日: | 2014-09-03 |
发明(设计)人: | 马志军;薛家禄 | 申请(专利权)人: | 河南利伟生物药业股份有限公司 |
主分类号: | C07J9/00 | 分类号: | C07J9/00 |
代理公司: | 郑州大通专利商标代理有限公司 41111 | 代理人: | 陈勇 |
地址: | 450000 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 胆固醇 分离 纯化 方法 | ||
1.一种7-去氢胆固醇的分离纯化方法,其特征在于,所述分离纯化方法包括以下步骤:
a、利用现有胆固醇生物转化合成方法得到的7-去氢胆固醇发酵物质中含有酵母菌培养基、未转化的原料胆固醇和7-去氢胆固醇;首先将所得7-去氢胆固醇发酵物质溶解于溶剂正己烷中,并加入水,所述正己烷和水的加入量均为7-去氢胆固醇发酵物质体积的5~10倍,加入正己烷和水后在常温下搅拌1~1.5h;搅拌后进行过滤,除去不溶于水和正己烷的杂质;所得滤液静置分层,然后进行分液,分出水相和有机相;分液后采用正己烷洗涤所得水相2~3次,合并有机相;
b、将步骤a得到的有机相进行蒸馏,除去溶剂正己烷,得到的产物中加入48~52倍体积的甲醇,加热至64~66℃,在此条件下搅拌1.5~2小时,搅拌后进行抽滤,抽滤后得到滤液和滤渣;
c、将步骤b得到的滤液降温至室温进行结晶,结晶后进行抽滤,得到胆固醇;
d、将步骤b得到的滤渣加入正己烷和甲醇的混合物中,所述滤渣与正己烷和甲醇的混合物二者之间的体积比为1:10~12,所述正己烷和甲醇混合时二者之间的体积比1:1;然后升温至40℃~45℃,在此温度条件下搅拌1~1.5小时;搅拌后所得液体在真空度0.09MPa、10~15℃条件下进行蒸馏,蒸馏至原液体体积的30~35%;然后降温结晶,结晶后进行抽滤,最后得到高纯度产品7-去氢胆固醇。
2.根据权利要求1所述的7-去氢胆固醇的分离纯化方法,其特征在于:步骤b中所述搅拌后进行抽滤,其抽滤时真空度为0.09MPa、温度为15~20℃。
3.根据权利要求1所述的7-去氢胆固醇的分离纯化方法,其特征在于:步骤c中所述结晶时的结晶时间为12~14h。
4.根据权利要求1所述的7-去氢胆固醇的分离纯化方法,其特征在于:步骤c所述抽滤时真空度为0.09MPa、温度为常温。
5.根据权利要求1所述的7-去氢胆固醇的分离纯化方法,其特征在于:步骤d中所述滤渣与正己烷和甲醇的混合物二者之间的体积比为1:10。
6.根据权利要求1所述的7-去氢胆固醇的分离纯化方法,其特征在于:步骤d中所述降温结晶为降温至0℃进行结晶5~6小时;所述结晶后进行抽滤,抽滤时真空度为0.09 MPa、温度为0℃。
7.根据权利要求1所述的7-去氢胆固醇的分离纯化方法,其特征在于:步骤d中所述高纯度产品7-去氢胆固醇的纯度大于98%。
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