[发明专利]一种制备白僵菌素的方法

说明书

本发明公开了一种制备白僵菌素的方法。该制备白僵菌素的方法，包括在装有玉米渣培养基的发酵容器中固体发酵层出镰孢(Fusarium proliferatum)CGMCC3.1777，收集固体发酵产物得到白僵菌素的步骤；所述玉米渣培养基是用水和玉米渣制成的含水量为50％(质量百分含量)的固体培养基；将所述发酵容器置于24℃‑28℃、相对湿度为50％‑100％的环境中进行所述固体发酵。该方法的白僵菌素产量达3405mg/g固体发酵产物。

技术领域

本发明涉及生物技术领域中一种制备白僵菌素的方法。

背景技术

白僵菌素是一种六元环状缩酯肽化合物，由3个甲基苯丙氨酸和(D)-α-羟基异戊酸残基交替相连而成，分子式为C₄₅H₅₇N₃O₉，分子量为786。白僵菌素是真菌的次级代谢产物，Hamil于1969年首次从球孢白僵菌的菌丝体中提取得到。至今为止，已经从Beauveriabassiana和几种其他的真菌中分离得到了白僵菌素。白僵菌素对蚊子幼虫、卤虫、绿头苍蝇和鞘翅目害虫等有杀伤作用。目前，白僵菌素主要被用作杀虫剂和除菌剂等。

近年来，越来越多的研究表明白僵菌素除了杀虫之外还具有很多生物活性。2000年，Nilanonta报道了其同系物的抗结核和疟原虫的活性。2004年，Fukuda从Beauveriasp.FKI-1366中分离得到了白僵菌素及其3个同系物，并与咪康唑配合进行了抗Candidaalbicans活性的测定，结果表明通过配合白僵菌素使用咪康唑，不仅能够抑制普通白假丝酵母，而且能够有效抑制对咪康唑有抗药性的白假丝酵母。2004年，Jow等发现白僵菌素能够诱导人白血病细胞的凋亡。2005年，Lin等对白僵菌素诱导人肺癌细胞凋亡的机制进行了研究。然而，白僵菌素对哺乳动物的毒性较大，可影响动物或人类的健康，可引起鼠和人类肿瘤细胞系显著的细胞死亡，并且强效和特异的抑制鼠肝脏微体中胆固醇酰基转移酶活性。2003年，Dombrink-Kurtzman还发现白僵菌素能够诱导火鸡外周血液中淋巴细胞的凋亡，从而影响其免疫系统，白僵菌素的毒性极大地限制了它的应用。

白僵菌素与低剂量的酮康唑产生互动效果，不仅大大提高了抗菌效率(尤其对耐药菌)，同时也加大了抗耐药菌的抗菌谱并降低了毒副作用，并且为杀真菌病原菌(fungicidal)而非抑制(fungistasis)。

基于以上优点，白僵菌素具有成为药物的潜在能力。为了能够制备白僵菌素用于以后的研究，需要提高白僵菌素的产量水平。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种制备白僵菌素的方法，该方法的白僵菌素产量高。

本发明所提供的制备白僵菌素的方法，包括在装有玉米渣培养基的发酵容器中固体发酵层出镰孢(Fusarium proliferatum)CGMCC3.1777，收集固体发酵产物得到白僵菌素的步骤；所述玉米渣培养基是用水和玉米渣制成的含水量为50％(质量百分含量)的固体培养基；将所述发酵容器置于24℃-28℃、相对湿度为50％-100％的环境中进行所述固体发酵。

上述方法中，所述玉米渣是将玉米籽粒粉碎至1mm³颗粒得到的玉米籽粒粉碎物。

上述方法中，所述固体发酵可进行20天。