[发明专利]一种地加瑞克的固相合成方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种地加瑞克的固相合成方法。

背景技术

地加瑞克(degarelix)，商品名为Firmagon，是Ferring Pharmaceuticals公司开发的degarelix粉针剂，经美国FDA批准，2008年12月24日在美国上市。适应症：FIRMAGON是GnRH受体拮抗剂用于治疗晚期前列腺癌。地加瑞克系一促性腺激素释放激素(GnRH)受体抑制剂类药物，可逆性抑制垂体GnRH受体来减少促性腺激素释放继而抑制睾酮的释放。地加瑞克通过抑制对前列腺癌持续生长至关重要的睾酮来延缓前列腺癌的生长和恶化。以激素治疗前列腺癌来降低睾酮浓度的初期却造成睾酮浓度激增，此初始刺激该激素受体可暂时性促进肿瘤生长而不是抑制它，而地degarelix则不会。Ⅲ期临床研究显示，地加瑞克降低睾酮浓度的效果至少可与亮丙瑞林储库型控释注射剂(Lupron Depot)相媲美，而且降低睾酮浓度在统计学上显著快。在治疗的第3日，地加瑞克组96％达到去生殖腺的睾酮浓度，亮丙瑞林组效果为0％。第14日，地加瑞克组99％达到去生殖腺的睾酮浓度，亮丙瑞林组为18％。在临床研究中，前列腺特异抗原(PSA)浓度可作为监测的第2个疗效判断终点。使用degarelix两周后降低PSA64％，1月后85％，3月后95％，在治疗的整个1年中始终抑制PSA。副作用表现为：注射部位反应(如疼痛，红斑，肿胀，或硬结)，潮热，体重增加，血清转氨酶和γ-谷氨酰转肽酶(GGT增加)。

地加瑞克为含有七个非天然氨基酸的线性十肽，分子量为1632.26，CAS登记号为214766-78-6，其氨基酸序列为Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-Hor)-D-4Aph(Cbm)-Leu-Ilys-Pro-D-Ala-NH₂。结构式如下。

专利文献WO9846634报道了一种Boc固相合成法合成地加瑞克的方法，将Boc-D-Ala-OH和MBHA树脂进行偶联，然后再洗涤，用酸脱除Boc保护基，连接下一个氨基酸，其中5位和6位的4Aph的侧链采用Fmoc保护，然后用哌啶/DMF溶液脱除保护基，侧链上再分别添加L-Hor和Cbm基团。此外，WO2011066386和US5925730也是采用Boc固相合成法合成地加瑞克，专利文献WO2011066386中的Ser侧链用容易酸解离得Trt保护，但由于Trt保护基的位阻大和它的疏水性，造成接肽比较困难，需要较长的时间连接，容易产生副产物和消旋。此外，Boc固相合成法都需要用HF进行裂解，对人体和环境都会造成很大危害。

专利文献WO2010121835公开了一种Fmoc固相合成法合成地加瑞克的方法，5位和6位分别用Fmoc-Aph(L-hor)-OH和Fmoc-Aph(tBuCbm)-OH进行偶联。根据相关文献，5位4-氨基苯丙氨酸侧链上的氢化乳清酸片段在碱性环境下不稳定，容易发生重排生成海因结构的副产物，上述专利在接完5位氨基酸后，需要用哌啶/DMF碱溶液反复脱保护，容易发生异构化。专利文献CN102329373A和CN102952174A合成地加瑞克的也是用Fmoc策略固相合成法合成的，它们的5位4-氨基苯丙氨酸侧链先用Trt或Alloc保护，接完十肽后，脱除保护基再添加上Hor。侧链上的Trt保护基需要用TFA脱除，在酸脱除过程中，ILys侧链上的Boc保护基容易脱落，此外，肽和树脂接头处也容易在TFA处理时发生断裂。侧链上的Alloc保护基脱除时容易引入重金属物质，不适合药物合成。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种步骤精简且收率高的地加瑞克的固相合成方法。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

一种地加瑞克的固相合成方法，该方法包括如下步骤：

(1)将ivDde-OH和Fmoc-Aph-OH溶于无水乙醇中，加入三氟乙酸，回流反应，TLC检测反应进程，合成Fmoc-Aph(ivDde)-OH，反应完成后，蒸干，稀盐酸和饱和NaCl溶液各洗一次，纯化得到双保护氨基酸；