[发明专利]一种药物靶标捕获方法有效
申请号: | 201410214864.3 | 申请日: | 2014-05-21 |
公开(公告)号: | CN104181221B | 公开(公告)日: | 2017-02-01 |
发明(设计)人: | 李进;杨本艳姿;窦登峰;葛啸虎;宋宏梅;万金桥;张艳;胡晓;王星;冯静超;钟国庆 | 申请(专利权)人: | 成都先导药物开发有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙)51222 | 代理人: | 李高峡,杜朗宇 |
地址: | 610041 四川省成都市高新区*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 药物 靶标 捕获 方法 | ||
1.一种药物靶标捕获方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)取原料:取化合物以及DNA或RNA或其它特异亲和材料的一方;
(2)连接:将化合物与DNA或RNA或其它特异亲和材料的一方共价连接得化合物;
(3)转运:用基因转运方法,将步骤(2)得到的标签化合物分别转运至细胞内;
(4)靶标捕获:将步骤(3)的细胞破碎,用固定化的互补DNA或RNA捕获步骤(1)中的DNA或RNA、或用固定化特异亲和材料的另一方来捕获步骤(1)中的亲和材料一方,将靶标富集;
(5)靶标识别;
(6)靶标确认,即可。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:
步骤(5)所述靶标识别是将富集的靶标从固定相上解离,用胶电泳的方法展开,用蛋白组学的方法,比较差异蛋白,从而识别潜在的靶标;
步骤(6)所述靶标确认是按优先级表达或购买(5)中识别的靶标,并逐一通过化合物与这些靶标的相互作用比较,最终达到化合物靶标的确认。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,所述化合物的分子量为100~4000Da。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,所述化合物为用于步骤(2)中共价连接的、经过化学修饰并具有与靶标化合物相似生物活性的化合物。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)所述的DNA或RNA为在所述范围的任意序列并具有步骤(2)中用于与化合物共价连接的官能团。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,所述DNA或RNA的长度不小于5个碱基对或碱基。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,所述DNA或RNA标记有生物素或荧光或同位素或其它用于示踪的标记。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)所述其它亲和材料的一方为任意无明显细胞毒性的、具有与步骤(2)中化合物共价连接的特异性亲和材料对的一方。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2)所述的标签化合物为具有与待识别靶标化合物相似活性的化合物。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(3)中,所述基因转运的方法是不造成明显细胞损伤的所有转运方法。
11.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(3)中,所述基因转运方法是阳离子脂质体转染法、磷酸钙法转染法、纳米颗粒转染法或电穿孔转染法以及其它能够将核酸转运至细胞内的技术手段。
12.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:步骤(6)中,所述的相互作用为靶标与未经修饰的化合物的亲和性。
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