[发明专利]一种白色链霉菌及其应用有效
申请号: | 201410216869.X | 申请日: | 2014-05-21 |
公开(公告)号: | CN104120095A | 公开(公告)日: | 2014-10-29 |
发明(设计)人: | 罗施中;刘欣;高红柳;陈慧 | 申请(专利权)人: | 北京化工大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P13/02;C12R1/47 |
代理公司: | 北京庆峰财智知识产权代理事务所(普通合伙) 11417 | 代理人: | 刘元霞 |
地址: | 100029 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 白色 霉菌 及其 应用 | ||
1.一种白色链霉菌(Streptomyces albus)Ls2,其特征在于,其保藏号为CGMCC NO.8472。
2.如权利要求1所述的白色链霉菌Ls2,其特征在于,其在高氏一号固体培养基上单细胞繁殖生长形成的菌落为白色丝状,边缘干燥中央塌陷;镜检细胞为杆状,无隔断,长度1.0-3.0mm;革兰氏阴性;在20-40℃的温度下均能生长,最适生长温度为28-30℃;生长pH范围为3.0-9.5,最适生长pH为6.8-7.2;需氧生长;碘化铋钾实验生成橙红色沉淀,甲基橙实验生成橙色沉淀;其中,所述高氏一号固体培养基的配方为:葡萄糖50份,氯化钠0.5份,硝酸钾1份,磷酸氢二铵0.5份,硫酸镁0.5份,硫酸亚铁0.01份,硫酸铵0.66份,硫酸锌0.01份,酵母膏0.1份,琼脂粉15份和水1000份。
3.如权利要求1或2所述的白色链霉菌Ls2在生产ε-聚L-赖氨酸中的应用。
4.一种生产ε-聚L-赖氨酸的方法,其包括如下步骤:
(1)将如权利要求1或2所述的白色链霉菌Ls2的试管种接种于液体摇瓶发酵培养基中,培养温度为28-30℃,培养时间为2-3天,获得发酵液,在培养过程中无需调节pH值;
其中,液体摇瓶发酵培养基的组成以重量份计为:
酵母膏5份,葡萄糖50份,硫酸铵10份,硫酸亚铁0.03份,硫酸镁0.5份,硫酸锌0.04份,磷酸氢二钾0.8份,磷酸二氢钾1.36份,和水1000份;
制备液体摇瓶发酵培养基的方法为:称取酵母膏、硫酸铵、硫酸亚铁、硫酸镁、硫酸锌、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾放入水中,充分混匀后将pH值调节至6.8,121℃湿热灭菌20分钟,然后再加入经单独灭菌的葡萄糖水溶液,混匀冷却后备用;
(2)将发酵液离心,取上清液用1mol/L的NaOH溶液将其pH值调节至8,静置0.5h后用滤纸过滤去除沉淀,得滤液;
(3)用弱酸性阳离子交换树脂HD-2对滤液进行震荡吸附8-16h,其中,滤液浸过树脂并高于树脂约3厘米,静置0.5-1h后过滤,将树脂用蒸馏水冲洗3-5次,然后用0.1mol/L的HCl溶液对树脂进行震荡洗脱8-16h,静置0.5-1h后过滤,用1mol/L的NaOH溶液将洗脱液的pH值调节至6.5,然后减压浓缩得浓缩液;
(4)在浓缩液中加入乙醇乙醚体积比为2:1的混合液,其中,浓缩液与乙醇乙醚混合液的体积比大约为1:10,混匀,过滤除去液体,沉淀即ε-聚L-赖氨酸。
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