[发明专利]一种大鲵烂腿病病原菌灭活疫苗制备方法

权利要求书

1.一种大鲵烂腿病病原菌灭活疫苗的制备方法，其特征在于按照以下步骤进行：

步骤1：将嗜水气单胞菌接种于LB培养基中，28℃培养48h；

步骤2：离心法集菌，以灭菌生理盐水将菌液浓度调至1×10⁸cfu/ml，置于70℃恒温水浴灭活3h，将灭活后的菌液置于高速离心机中，用3000r/min离心机离心35min，分离出上清液；

步骤3：向分离出的每10ml上清液中添加7500-8500U的青霉素和福尔马林溶液摇匀；

步骤4：使用平皿法证实嗜水气单胞菌已被彻底灭活后，用灭菌生理盐水清洗3次，调浓度至1×10⁸cfu/ml，制成福尔马林灭活的菌苗液，即为大鲵烂腿病病原菌灭活疫苗；

步骤5：将稀释后的灭活菌苗液分装后，置于4℃冰箱中保存备用。

2.按照权利要求1所述一种大鲵烂腿病病原菌灭活疫苗的制备方法，其特征在于：所述嗜水气单胞菌编号为WL3-X2；所述嗜水气单胞菌为分离自患烂腿病大鲵肝脏组织的病原菌。

3.按照权利要求1所述一种大鲵烂腿病病原菌灭活疫苗的制备方法，其特征在于：所述步骤3中，福尔马林最终与在溶液里的含量为0.5％。