[发明专利]离体快繁中华蓑藓配子体的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种利用植物组织培养技术进行离体快繁中华蓑藓配子体的方法，属于生物工程技术领域。

背景技术

木灵藓科(Orthotrichaceae)蓑藓属(Macramitrium Bridel)是泛热带分布的类群。中国的蓑藓属植物种类非常丰富，目前被接受的有40余种。其中中华蓑藓(Macromitrium cavaleriei Card.&Thér.)是Cardot在1906基于J.Cavalerie从贵州(Kouy Techeou)采集的标本描述的新种，记录于我国西南地区狭窄的分布区域，该种的主要特点是树附生，茎叶湿润状态下常反折或近贴茎，椭圆状披针形到三角状披针形，先端渐尖；枝叶线状或卵圆状披针形至披针形，多数渐尖或狭渐尖，有的枝叶阔渐尖；叶片中部和上部细胞膨胀状，薄壁，细胞之间界线清楚，有2～4个小疣或近光滑无疣，叶片下部细胞菱形状、长方形或亚条形状，光滑或具有一单疣；内苞叶椭圆形披针形，狭渐尖至长渐尖芒状，钟形蒴帽，具黄色毛。

苔藓植物是世界上重要的植物群之一，因为他的体积十分的小而且缺少俗名，它们的美丽和多样性常常被人们忽略。全世界苔藓植物数量现有23000多种,我国苔藓植物种类也比较丰富,约有2800多种。

苔藓植物在生态环境方面有着自己独特的作用。苔藓植物能够作为环境变化的综合性指示植物，这是因为它们对于自然条件较为敏感，所以使得苔藓植物成为监测大气污染的指示植物。苔藓植物拥有很强大的吸水能力，尤其是当密集丛生时，其吸水量高时可达植物体干重的15—20倍，而其蒸发量却只有净水表面的1/5。因此，在干旱地区通过种植苔藓植物在土表结皮，防止土壤水分散失的同时又可起到固沙的重要的作用。随着时代文明程度的提升，人们对于生态环境的要求，对于美的追求都越来越高。苔藓，作为无维管束植物，在我们的生活中可谓是随处可见，是十分具有观赏性的绿色植物，其在园林造景方面有着自己的一席之地。园林中人们利用苔藓植物结合其他造园要素，如山石，树木，小品等，可以创造出一种充满生活情趣的园林景观。

通过植物组织培养方式，建立中华蓑藓快繁系统，既可以为利用中华蓑藓指示和监测大气污染提供理想的试验材料，也可以为应用中华蓑藓进行园林绿化和造景提供丰富种源。目前现有技术中还没有关于中华蓑藓在试管瓶内大量扩繁配子体的培养技术，也没有通过利用中华蓑藓孢朔离体培养获得配子体的相关研究报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用植物组织培养技术离体快繁中华蓑藓配子体的方法，以填补现有技术的空白，实现人工大量快速扩繁中华蓑藓配子体。

为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明公开的组织培养快繁中华蓑藓配子体的方法包括以下顺序步骤：

1)将中华蓑藓孢蒴表面灭菌后，接种到无任何激素的改良Knop′s培养基上，用无菌器械破碎孢蒴使孢子释放，培养10天后，孢子萌发产生原丝体，再培养30天后，经原丝体分化获得配子体，培养条件为：温度23±2℃，光照强度2000±250lx，光照时间14小时/天；所述无任何激素的改良Knop′s培养基配方为：改良Knop′s基本培养基+10g/L蔗糖+6g/L琼脂粉，其中改良Knop′s基本培养基配方为：KNO₃250mg/L、MgSO₄·7H₂O250mg/L、KH₂PO₄250mg/L、Ca(NO₃)₂·4H₂O1000mg/L、酒石酸氨0.115mg/L、NaFe-EDTA36.7mg/L、MnSO₄·4H₂O11.15mg/L、H₃BO₃3.1mg/L、KI0.415mg/L、ZnSO₄·7H₂O4.3mg/L、CuSO₄·5H₂O0.0125mg/L、NaMoO₄·2H₂O0.125mg/L、CoCl₂·6H₂O0.0125mg/L；