[发明专利]屠宰厂废水养殖球等鞭金藻和异胶藻的培养基及培养方法有效
申请号: | 201410222836.6 | 申请日: | 2014-05-26 |
公开(公告)号: | CN103966100A | 公开(公告)日: | 2014-08-06 |
发明(设计)人: | 王培磊 | 申请(专利权)人: | 临沂大学 |
主分类号: | C12N1/12 | 分类号: | C12N1/12;C12R1/89 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 276000 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 屠宰 废水 养殖 鞭金藻 异胶藻 培养基 培养 方法 | ||
1.一种利用屠宰厂废水混合养殖球等鞭金藻和异胶藻的培养基,其特征在于配方如下:
屠宰厂废水50毫升,牛肉浸膏1.0克,蛋白胨1.5克,酵母膏0.5克,葡萄糖2.0克,L-谷氨酸0.1克,琼脂1.5克,可溶性淀粉1.2克,NH4NO315毫克,NaNO34毫克,尿素3毫克,KH2PO41.5毫克,鸡粪浸出液2.5毫升,兔粪浸出液1.8毫升,海泥抽取液1.5毫升,土壤抽出液1.2毫升,S3维生素溶液1.0毫升,次氯酸钠消毒后的纯净海水1000毫升,
其中S3维生素溶液配方:硫胺素盐酸盐50毫克,尼古丁酸10毫克,泛酸钙10毫克,对氨安息香酸1.0克,维生素H0.1克,肌醇0.5克,叶酸0.2微克,胸间氮苯0.3克,蒸馏水1000毫升。
2.一种球等鞭金藻和异胶藻混合培养方法,其特征在于具体步骤如下:
培养容器为圆柱形有机玻璃反应器,柱高90厘米,直径30厘米,壁厚5毫米,顶部有一盖子,盖子上有3个孔,一个孔插入充气管,另一个孔插入排气管,中间一个孔插入导线,导线末端连着一个100瓦的节能灯,底部按着一个水龙头,将反应器洗刷干净,后用蒸馏水润洗3遍,用漏斗装入权利要求1所述的培养基至水深55厘米,充气混合5分钟,选择生命力旺盛、无污染的球等鞭金藻和异胶藻藻液分别进行接种,先接种球等鞭金藻,接种密度8×104cell/mL,再接种异胶藻,接种密度15×104cell/mL;瓶口插入两根干净玻璃管,一根较长,顶端露出瓶口7-10厘米,下端插入较深,离瓶底5厘米,用以充气,另一根较短,16厘米,两端露出盖子即可,用以排气;两根玻璃管同样粗细,直径6毫米,用干净的透明胶带将两根玻璃管固定,长的玻璃管上端用料管与充气泵相连,充入混合气体,混合气体成分和体积比例是(空气∶纯二氧化碳∶氨气∶甲烷)=92%∶6%∶1%∶1%;充气量不宜太大,以藻细胞浮起不下沉即可,室内培养,空调控温,最佳温度23±2℃,节能灯照射,光照强度6000-10000Lux,光/暗周期为16L/8D,即光照16小时,黑暗8小时,培养至第6天,停止充气,拿开盖子,补充新鲜的权利要求1所述的培养基至水深60厘米,盖上盖子,充气,继续培养,至第9天,球等鞭金藻和异胶藻密度分别增加至100×104cell/mL和4000×104cell/mL,停止培养,从底部的水龙头放出藻液,将反应器洗刷干净后,加入中药消毒液消毒30分钟,后进入下一轮培养;
所述中药消毒液由以下重量比的物质组成:每100份85%乙醇中加入以下重量份的中药材:板蓝根30~50份、柴胡15~25份、薄荷15~25份、栀子5~15份、艾叶5~15份,中药消毒液制作方法:将新鲜板蓝根、柴胡、薄荷叶、艾叶、山栀果切碎,于60-70℃下烘干,再用中药材粉碎机分别粉碎至70目备用,用托盘天平分别称取烘干并粉碎的板蓝根120克,柴胡60克,薄荷叶60克,艾叶30克,山栀果30克,置于三角烧瓶中充分混合后,加入1000毫升85% 乙醇,浸泡48小时,200筛绢过滤,将清液静置沉淀36小时,撇去液面漂浮物,取中上层的清液,即为复方中药消毒液,密封于黑色试剂瓶中,贴上标签,置于4℃冰箱备用。
3.根据权利要求2所述的一种球鞭金藻和异胶藻混合培养方法,其特征在于,对选用的所述的反应器,洗刷干净后进行消毒,使用紫外灯消毒,消毒10-20分钟。
4.根据权利要求2所述的一种球鞭金藻和异胶藻混合培养方法,其特征在于,对选用的所述的反应器,洗刷干净后进行消毒,使用高压氮气喷射消毒,消毒5-10分钟。
5.根据权利要求2所述的一种球鞭金藻和异胶藻混合培养方法,其特征在于,对选用的所述的反应器,洗刷干净后进行消毒,使用高压二氧化碳喷射消毒,消毒5-6分钟。
6.根据权利要求2所述的一种球鞭金藻和异胶藻混合培养方法,其特征在于,对选用的所述的反应器,洗刷干净后分两个阶段消毒,先使用高压氮气喷射消毒,消毒2-3分钟,使用高压二氧化碳喷射消毒,消毒2-3分钟,消毒完毕后再进行藻类培养。
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