[发明专利]一种利用尿素厂废水培养莱茵衣藻的培养基及培养方法有效
申请号: | 201410222838.5 | 申请日: | 2014-05-26 |
公开(公告)号: | CN103966102A | 公开(公告)日: | 2014-08-06 |
发明(设计)人: | 王培磊 | 申请(专利权)人: | 临沂大学 |
主分类号: | C12N1/12 | 分类号: | C12N1/12;C12R1/89 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 276000 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 尿素 废水 培养 莱茵衣藻 培养基 方法 | ||
1.一种利用尿素厂废水培养莱茵衣藻的培养基,其特征在于配方如下:
尿素厂废水85毫升,酵母浸粉10毫克,脱氧胆酸钠5毫克,山梨醇12毫克,甘露醇8毫克,硫代乙醇酸钠4毫克,土壤抽出液1.8毫升,羊粪浸出液2.5毫升,鸡粪浸出液1.2毫升,L-精氨酸3毫克,磷酸二氢钾6毫克,麦饭石粉10毫克,柠檬酸铁7毫克,S3维生素溶液1.5毫升,酪蛋白胨8毫克,甘油15毫克,麦芽糖20毫克,乳糖16毫克,可溶性淀粉25毫克,酵母膏15毫克,硅藻土粉12毫克,次氯酸钠消毒后的纯净淡水1000毫升,
其中S3维生素溶液配方:硫胺素盐酸盐50毫克,尼古丁酸10毫克,泛酸钙10毫克,对氨安息香酸1.0克,维生素H0.1克,肌醇0.5克,叶酸0.2微克,胸间氮苯0.3克,蒸馏水1000毫升。
2.一种利用尿素厂废水培养莱茵衣藻方法,具体步骤如下:
培养容器为家庭用的矿泉水桶,容积20升,靠近底部有一水龙头,无色透明或带浅天蓝色,洗刷干净,后用蒸馏水润洗3遍,用漏斗装入权利要求1所述的培养基12升,充分摇匀5分钟,选择生命力旺盛、无污染的莱茵衣藻进行接种,接种密度4×104cell/mL,接种后轻轻摇动矿泉水桶5分钟,使藻细胞均匀分布,瓶口插入两根干净玻璃管,一根较长,顶端露出瓶口10厘米,下端插入较深,离瓶底5厘米,用以充气,另一根较短,16厘米,两端露出瓶口即可,用以排气,两根玻璃管同样粗细,直径6毫米,最后用酒精棉球擦拭瓶口,用干净的透明胶带封口并将两根玻璃管固定,长的玻璃管上端用料管与充气泵相连,充入混合气体,混合气体成分和体积比例是空气∶氨气∶臭氧∶一氧化氮=97%∶1%∶1%∶1%;充气量不宜太大,以藻细胞浮起不下沉即可,室内培养,空调控温,最佳温度25±2℃,日光灯照射,光照强度4000-10000Lux,光/暗周期为16L/8D,即光照16小时,黑暗8小时,培养至第6天,停止充气,揭开透明胶带,用漏斗从瓶口加入3升新鲜培养基,胶带重新封口,充气,继续培养,至第9天,莱茵衣藻密度增加至600×104cell/mL,停止培养,从底部的水龙头放出藻液,将培养容器洗刷干净后,加入0.2%过氧乙酸消毒溶液浸泡消毒2小时,再用蒸馏水润洗2遍,后进入下一轮培养。
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