[发明专利]血清Exosomes来源的长链非编码RNA PRKAG2-AS1的应用方法

说明书

技术领域

本发明属于肿瘤分子生物学领域，具体涉及血清Exosomes来源的LncRNA PRKAG2-AS1在制备胶质瘤患者预后试剂中应用方法。

背景技术

胶质瘤约占颅内肿瘤的40.49％。脑肿瘤中胶质细胞瘤发病率最高，大脑半球发生的胶质瘤约占全部胶质瘤的51.4％。由于大多数胶质瘤呈浸润性生长且与周围脑组织边界不清，即使是最现代的神经外科技术也难以做到病理学上的全切除,因而胶质瘤术后复发率非常高，且随着手术和复发次数的增加,其恶性程度有增加的趋势。目前而言胶质瘤的诊断和治疗方法虽处于不断改进阶段，但是胶质瘤患者生存率并没有明显提高。胶质瘤诊断仍然处于以临床、病理学和影像学信息为基础的经验性阶段，而且一经诊断，绝大多数均为中晚期，远远不能适应对胶质瘤进行高危人群筛查和早期诊断的需求。因此，寻找无创伤性的胶质瘤早期诊断标志物对高危人群进行筛查，以便对胶质瘤患者进行早期诊断、早期治疗，提高患者生存率，一直是神经科学领域研究的主要任务。

Exosomes来源于多囊泡体，是由活细胞分泌而来的大小介于30-100nm的含有RNA、脂质和蛋白质的微囊泡。Exosomes广泛存在于血清，尿液，细胞培养上清，唾液等各种体液中，可在体液中来回穿梭，在细胞之间运送遗传物质和蛋白质。研究发现，在顺铂诱导急性肾损伤的大鼠模型的尿液Exosome中发现Fetuin-A表达上调，由此尿液Exosome中Fetuin-A的检测可作为诊断标志物；在膀胱癌患者尿液来源的Exosomes中还发现了PCA-3,TMPRSS2两个生物标志物；在黑色素瘤患者血浆Exosomes中肿瘤相关标志物CAV1表达水平明显增加，以此可诊断黑色素瘤；肿瘤细胞来源的Exosomes中miRNA的表达谱可作为卵巢癌的诊断标记物。因此Exosomes可用于肿瘤的早期诊断，也可作为靶向药物的载体进行疾病治疗。Exosomes具有在血清中稳定存在的特性，含有特异性的物质且可保护RNA免受RNA酶的作用，克服了直接利用血液提取分子进行肿瘤诊断的血液中非检测物质的影响，使检验结果更加真实，精确。利用Exosomes来源的LncRNA PRKAG2-AS1来诊断脑胶质瘤不仅减少了患者的痛苦和不便，而且提高了检验结果的灵敏性，特异性。以上显示出血清Exosomes来源的LncRNA PRKA G2-AS1在胶质瘤早期诊断和筛查中的巨大潜力。

LncRNA PRKAG2-AS1(protein kinase,AMP-activated,gamma2non-catalytic subu nit)定位于染色体7q36.1，GeneBank登录号：NR_038926。有研究证实PRKAG2可在TP53的信号通路中发挥作用，并且PRKAG2与癌症患者的存活率密切相关。

发明内容

本发明的目的在于提供一种血清Exosomes来源的LncRNA PRKAG2-AS1的应用方法，尤其是一种能够用于制备胶质瘤高危人群的筛查、早期诊断或者胶质瘤患者的预后制剂的应用方法。研究证实血清Exosomes来源的LncRNA PRKAG2-AS1可用于胶质瘤患者的诊断，Exosomes来源的LncRNA PRKAG2-AS1表达下调与胶质瘤组织验证结果具有一致性，且检验结果的灵敏性高，特异性好。因此Exosomes可用于胶质瘤高危人群的筛查和早期诊断和预后。

血清Exosomes来源的长链非编码RNA PRKAG2-AS1的应用方法，所述的血清Exosomes来源的长链非编码RNA PRKAG2-AS1用于制备胶质瘤高危人群的筛查、早期诊断或者胶质瘤患者的预后制剂，该长链非编码RNA PRKAG2-AS1的序列见SEQ NO:1。

所述的用于制备胶质瘤高危人群的筛查、早期诊断或者胶质瘤患者的预后制剂具体包括实时荧光定量PCR检测试剂。

所述的实时荧光定量PCR检测试剂包括进行实时荧光定量PCR的特异性引物：

LncRNA PRKAG2-AS1正向引物：5'-CAGTTCTCATCAAATAGGGTGT-3'，

LncRNA PRKAG2-AS1反向引物：5'-TATTGTCCCACTGAATGCTC-3'。

所述的实时荧光定量PCR检测试剂为试剂盒，