[发明专利]一种主产纤维素酶饲用益生菌制剂的液态发酵生产方法

权利要求书

1.一种主产纤维素酶饲用益生菌制剂的液态发酵生产方法，其特征在于其包括如下步骤：

1）发酵菌种的制备：菌种为芽孢杆菌和酿酒酵母；将试管斜面保存的菌种转接活化培养基，28-32℃的旋转摇床上培养20-35小时至菌种的对数生长期；所述的芽孢杆菌的活化培养基的配方组分（g/L）：酵母粉 5-8，蛋白胨 10-16，氯化钠 6-12，pH 7.0；所述的酿酒酵母的活化培养基的配方组分（g/L）：酵母粉 2-6，蛋白胨 10-15，葡萄糖 20-30，pH 6.5；活化培养基在使用前均在115℃下灭菌20分钟；

2）发酵用液体培养基的制备：

发酵用液体培养基的配方组分（g/L）为：啤酒糟的干燥粉碎物 5-20，玉米面 40-60，葡萄糖 10-20，蛋白胨 10-20，酵母粉 5-10，磷酸氢二钾 3-6，磷酸二氢钠 3-6，七水硫酸镁 0.5-2，pH 6.5—7.5；

3）主产纤维素酶的饲用益生菌混合发酵：

采用步骤2所述的液体发酵培养基进行阶段式混合菌种发酵；首先按照5—10%（v/v）的单菌接种量接入芽孢杆菌的活化菌种，通过发酵罐转速和无菌空气流量的调节使溶解氧控制在10%以上；

上述发酵培养阶段进行20-40小时后，添加按照6-15%（v/v）的接种量接入酿酒酵母活化菌种，同时通过流加补料方式补充葡萄糖至终浓度为2-5g/L，通过发酵罐转速和无菌空气流量的调节使溶解氧控制在2%以上；待酿酒酵母发酵培养8-12小时后终止发酵过程；

4）辅料添加：

发酵终止后，加入辅料增加固形物含量，辅料添加量为发酵液体积的20—50%，并搅拌均匀；辅料组成（按重量比计算）：玉米面20—30%，酒糟粉碎物30—50%，麸皮粉碎物20—50%；

5）产品干燥包装：

将4）步骤处理后的发酵液，在出风温度为80—85℃下，经喷雾干燥，包装获得成品。

2.根据权利要求书1所述的一种主产纤维素酶饲用益生菌制剂的液态发酵生产方法，其特征在于所述的芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌的至少两种。

3.根据权利要求书2所述的一种主产纤维素酶饲用益生菌制剂的液态发酵生产方法，其特征在于所述的芽孢杆菌从中国农业微生物菌种保藏中心（ACCC）获得，其中枯草芽孢杆菌是ACCC 编号为03291、03282、03338、04303、03317中的一种；地衣芽孢杆菌是ACCC 编号为03291、03314、02367、05186中的一种；短小芽孢杆菌是ACCC 编号为02757、04309、04305、04301、04297中的一种。

4.根据权利要求书1所述的一种主产纤维素酶饲用益生菌制剂的液态发酵生产方法，其特征在于所述的酿酒酵母从中国农业微生物菌种保藏中心（ACCC）获得，是ACCC 编号为20157、20168、20251、20064中的一种。