[发明专利]茄子花青素合成相关基因SmMYB1及其重组表达载体和在培育紫色番茄中的应用

说明书

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，涉及茄子花青素合成相关基因SmMYB1和含有该基因的重组表达载体，还涉及该基因在培育紫色番茄中的应用和方法。

背景技术

番茄作为一种世界范围内广泛栽培的农作物，其果实一直是广受大众所喜爱的蔬菜和水果。花色苷作为一种广泛存在于植物体内的水溶性类黄酮类色素，越来越多的研究证明花色苷不仅在植物应对不良环境(紫外照射、低温、干旱及病原菌入侵)时发挥积极作用，同时花色苷也对人类大量的慢性疾病(心血管病和肿瘤)的治疗有一定的帮助作用。大量资料证实，规律性的食用花色苷含量较高的食物对于人体的保健有着重要的价值。番茄作为一种在人们餐桌上出现频率较高的水果或蔬菜，自然栽培的番茄果实中的花色苷含量却微乎其微。通过基因工程的方法，我们将调控茄子果实花色苷合成的转录因子异源表达于与番茄中，获得了紫色的番茄植株及果实。番茄果实的色泽一直是育种工作者关注的重要问题，我们通过异源表达外源基因的方法，不仅改变了整个番茄植株的颜色，同时还改变了果实的颜色。传统的育种方法周期长、耗资多且效果不稳定。近年来，随着基因工程的迅速发展和转基因技术的日益完善，基因工程技术在培育优良作物品种方面显示了极大的潜力。基因工程技术势必会越来越广泛的应用于番茄品种的改良和育种当中。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供茄子花青素合成相关基因SmMYB1；本发明的目的之二在于提供含有茄子花青素合成相关基因SmMYB1的重组表达载体；本发明的目的之三载体提供含有重组表达载体的微生物转化体；本发明的目的之四在于提供茄子花青素合成相关基因SmMYB1在培育紫色番茄品种中的应用；本发明的目的之五在于提供茄子花青素合成相关基因SmMYB1在提高番茄果实中花色苷中的应用；本发明的目的之六在于提供培育紫色番茄品种的方法。

为实现上述发明目的，本发明提供如下技术方案：

1.茄子花青素合成相关基因SmMYB1，其核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。

2.含有权利要求1所述茄子花青素合成相关基因SmMYB1的重组表达载体。

优选的，所述重组表达载体是在pBI121载体的Sac I和Xba I酶切位点之间连入如SEQ ID No.3所示核苷酸序列。

3.含有所述重组表达载体的微生物转化体。

优选的，所述微生物转化体为根癌农杆菌LBA4404，也可以选择其他的农杆菌。

4.所述茄子花青素合成相关基因SmMYB1在培育紫色番茄品种中的应用。

5.所述茄子花青素合成相关基因SmMYB1在提高番茄果实花色苷含量中的应用。

6.培育紫色番茄品种的方法，包括如下步骤：

a.构建含如SEQ ID No.3所示核苷酸序列的重组表达载体，然后转化微生物转化体，制得工程菌；

b.将步骤a所得工程菌转化番茄外植体，然后在含30g/L的蔗糖、1mg/L吲哚乙酸、1.75mg/L玉米素、pH为5.8的MS固体培养基中于25±2℃、黑暗下共培养48小时；再转入含有30g/L的蔗糖、1.0mg/L吲哚乙酸、1.75mg/L玉米素、500mg/L羧苄青霉素和50mg/L卡那霉素、pH为5.8的MS固体培养基中，在25±2℃、光周期16h/d、光照强度1000-2000lx条件下培养至长出再生芽；待芽长至2-3cm时切下再生芽，转入含有30g/L的蔗糖、250mg/L羧苄青霉素和50mg/L卡那霉素、pH为5.8的MS固体培养基中，在25±2℃、光周期16h/d、光照强度1000-2000lx条件下培养至生根，即得紫色番茄品种。

优选的，所述重组表达载体的的构建方法为：用SEQ ID No.4和SEQ ID No.5所示序列为引物克隆携带酶切位点的茄子花青素合成相关基因SmMYB1，将Sac I和Xba I酶切后再与经同样双酶切的pBI121载体连接。