[发明专利]一种检测鲱鱼种类的方法及其检测试剂盒和引物有效

专利信息
申请号: 201410230967.9 申请日: 2014-05-28
公开(公告)号: CN103966346A 公开(公告)日: 2014-08-06
发明(设计)人: 江文涛;黄臻辉 申请(专利权)人: 上海第一生化药业有限公司
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 上海弼兴律师事务所 31283 代理人: 朱水平;沈利
地址: 200240 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 检测 鲱鱼 种类 方法 及其 试剂盒 引物
【权利要求书】:

1.一种检测鲱鱼种类的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

(1)提取待检测样本的基因组DNA,以其为模板,以特异性扩增引物对扩增待检测样本的基因组DNA,所述特异性扩增引物对的序列分别如序列表中SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2,或SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4,或SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6,或SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8,或SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10,或SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示,

(2)将步骤(1)所得PCR扩增产物进行凝胶电泳分析,有特异性条带的待测样本为太平洋鲱鱼(Clupea pallasii)或大西洋鲱鱼(Clupea harengus)。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法还包括步骤(3),将步骤(1)所得PCR扩增产物进行测序,将测序结果与鲱鱼属的COI基因进行序列比对,若样本序列与太平洋鲱鱼(Clupea pallasii)或大西洋鲱鱼(Clupea harengus)的COI基因匹配度≥99%,则确定待测样本为太平洋鲱鱼(Clupea pallasii)或大西洋鲱鱼(Clupea harengus)。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述PCR反应中,PCR的反应体系为:1×PCR反应缓冲液,10~15mmol/L Mg2+,0.2~0.3mmol/L dNTP,0.1~0.3μM特异性扩增引物对,Taq酶0.01~0.1U/μL,DNA模板10~100ng/μL。

4.一种检测鲱鱼种类的试剂盒,其特征在于,其包括特异性扩增引物对,所述特异性扩增引物对的序列分别如序列表中SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2,或SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4,或SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6,或SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8,或SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10,或SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示。

5.一种检测鲱鱼种类的引物,其特征在于,其序列如SEQ ID NO:1所示或者如SEQ ID NO:2所示。

6.一种检测鲱鱼种类的引物,其特征在于,其序列如SEQ ID NO:3所示或者如SEQ ID NO:4所示。

7.一种检测鲱鱼种类的引物,其特征在于,其序列如SEQ ID NO:5所示或者如SEQ ID NO:6所示。

8.一种检测鲱鱼种类的引物,其特征在于,其序列如SEQ ID NO:7所示或者如SEQ ID NO:8所示。

9.一种检测鲱鱼种类的引物,其特征在于,其序列如SEQ ID NO:9所示或者如SEQ ID NO:10所示。

10.一种检测鲱鱼种类的引物,其特征在于,其序列如SEQ ID NO:11所示或者如SEQ ID NO:12所示。

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