[发明专利]乳腺癌易感基因BRCA1/BRCA2突变检测试剂盒及其制备方法无效
| 申请号： | 201410233020.3 | 申请日： | 2014-05-28 |
| 公开（公告）号： | CN104017870A | 公开（公告）日： | 2014-09-03 |
| 发明（设计）人： | 陈伟 | 申请（专利权）人： | 杭州美中疾病基因研究院有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人： | 向庆宁 |
| 地址： | 310053 浙江省杭州市滨江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 乳腺癌 基因 brca1 brca2 突变 检测 试剂盒 及其 制备 方法 | ||
1.一种乳腺癌易感基因BRCA1/BRCA2热点突变检测试剂盒，其特征是所述试剂盒包括用于特异性扩增BRCA1/BRCA2基因靶向序列的3个引物对：
引物对1：BRCA1-Exon2
F: GGTTGGCAGCAATATGTG
R: AGAGGCAGAGTGGATGGA；
引物对2：BRCA1-Exon20
F: CTCTTATCCTGATGGGTTGT
R: TCTCATCTGCTTAAAGTCCC；
引物对3：BRCA2-Exon11
F: GGCAGGTTGTTACGAGGCAT
R: GTGAGCTGGTCTGAATGTTCG。
2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征是，所述试剂盒的制备方法包括以下步骤：
（1）位点检测预混液的配制：在普通PCR反应液体系的基础上，直接加入设计合成好的各位点引物，
引物对1：BRCA1-Exon2
F: GGTTGGCAGCAATATGTG
R: AGAGGCAGAGTGGATGGA；
引物对2：BRCA1-Exon20
F: CTCTTATCCTGATGGGTTGT
R: TCTCATCTGCTTAAAGTCCC；
引物对3：BRCA2-Exon11
F: GGCAGGTTGTTACGAGGCAT
R: GTGAGCTGGTCTGAATGTTCG；
制成各位点对应的PCR反应预混液；
（2）根据单个样品检测时所需预混液的量的比例，计算出检测100份样品所需的预混液用量，配制到一个可以封闭的棕色管子中，混匀，保存，即得所述试剂盒；
（3）成品反应液的性能检测：将配制好的试剂盒储存在一定条件下，对其中的成品反应液在不同时间段采用同一模板进行PCR扩增，并测序比对。
3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征是，所述成品反应液性能检测时间段为1天，1周，1个月，2个月，3个月。
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