[发明专利]一种β-葡聚糖基因载体及其制备方法和应用无效
| 申请号： | 201410236401.7 | 申请日： | 2014-05-30 |
| 公开（公告）号： | CN103981201A | 公开（公告）日： | 2014-08-13 |
| 发明（设计）人： | 许小娟;刘青业;张俐娜 | 申请（专利权）人： | 武汉大学 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 张火春 |
| 地址： | 430072 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 聚糖 基因 载体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种β-葡聚糖基因载体的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
（1）将β-葡聚糖溶于磷酸盐缓冲液中130-145℃下加热15-60分钟或溶于二甲基亚砜或强碱溶液中制得变性的单链多糖溶液；
（2）将poly(dA)n通过共价键与目标核苷酸键接并溶于pH 7-9缓冲液；
（3）将（1）得到的变性的单链多糖溶液加入到（2）得到的poly(dA)n-目标核苷酸/缓冲溶液中，混匀，静置12-48小时，得到β-葡聚糖基因载体。
2.根据权利要求1所述的β-葡聚糖基因载体的制备方法，其特征在于：步骤（1）中所述的β-葡聚糖为三螺旋β-葡聚糖，其分子量为5.0×104-4.5×105。
3.根据权利要求1所述的β-葡聚糖基因载体的制备方法，其特征在于：步骤（1）中所述的强碱溶液的浓度＞0.1M。
4.根据权利要求1所述的β-葡聚糖基因载体的制备方法，其特征在于：步骤（2）中所述的poly(dA)n中n≥15。
5.根据权利要求1所述的β-葡聚糖基因载体的制备方法，其特征在于：步骤（2）中所述的目标核苷酸包括DNA和RNA。
6.根据权利要求1所述的β-葡聚糖基因载体的制备方法，其特征在于：步骤（3）中变性单链多糖的终浓度/核酸的终浓度≥8。
7.根据权利要求1所述的β-葡聚糖基因载体的制备方法，其特征在于：步骤（3）中静置的温度为4-37℃。
8.一种β-葡聚糖基因载体，其特征在于：通过权利要求1-7任一项所述的方法制备得到。
9.权利要求8所述的β-葡聚糖基因载体在DNA和RNA的转载中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：权利要求8所述的β-葡聚糖基因载体在CpG DNA和siRNA的转载中的应用。
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