[发明专利]一种具有解磷能力的弗村假单胞菌及其应用

权利要求书

1.一种具有解磷能力的菌株ZSW-3-5-1a，其分类命名为弗村假单胞菌（Pseudomonas vranovensis），已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.8750。

2.含有权利要求1所述弗村假单胞菌ZSW-3-5-1a的微生物菌剂。

3.权利要求2所述微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：

1)菌种发酵

①将冻存的弗村假单胞菌ZSW-3-5-1a在37℃条件下快速解冻，按照0.5-1%的接种量接入装有10-15ml液体培养基A的试管中，28-32℃，静置培养8-12小时，得到ZSW-3-5-1a的一级种子液；

液体培养基A组成为：胰蛋白胨5 g，酵母粉 5 g，NaCl 10g，蒸馏水1000ml，pH值 7.2；

②二级三角瓶液体培养

将一级种子液按照3-5%的接种量接入装有50-100ml液体培养基A的三角瓶中，28-32℃，150-200rpm培养8-12小时；

③发酵罐发酵

将ZSW-3-5-1a的一级培养液按照5-10%的接种量分别接入装有发酵培养基E的发酵罐中，进行发酵培养，罐温28-32℃，培养pH6.8-7.5，通气培养48-72小时获得菌悬液，即为液体解磷菌剂，有效活菌数可达2.1-5×10⁹ CFU/ml；

发酵培养基E组成为：葡萄糖10-15g，麸皮5-10g，豆粕30-50g ，玉米粉3-5g，(NH₄)SO₄ 0.2-0.4g，KH₂PO₄ 5-10g，K₂HPO₄ 0.1-0.2g，KCl 0.2-0.5 g ，Ca₂(PO₄)₃ 10-13 g，MgSO₄·7H₂O 0.25-0.5g ，MgCl₂·6H₂O 5-10g，水1000ml，pH 6.8~7.5；

2）将秸秆粉、草炭土、麸皮和豆粕粉碎过60目筛，按照质量比为20-30:20-30:5-10:30-50的比例均匀混合再加入30-50%的发酵培养基E，混合均匀后，用布袋或耐高温塑料袋装，1-1.5Kg/袋，0.1MPa灭菌2-3小时，取出冷却即为发酵固态基质；

3）将步骤1）中得到的菌悬液按照100-200ml/kg的剂量与步骤2）中所得的发酵固态基质混匀，28-32℃发酵5-7天，即得到固体菌剂，菌体密度达到1-2×10⁹ CFU/g。

4.权利要求1所述弗村假单胞菌在促进植物生长中的应用。

5.权利要求2所述微生物菌剂的使用方法，其特征在于：液体菌剂在植物浸种或浸根时以100-500倍的液体菌剂稀释液浸泡种子或植物根部2-5小时，育苗期或生长期灌根采用1000-5000倍的液体菌剂稀释液10-40ml/Kg土壤剂量浇灌稀释液，整个生长期灌根1-3次；固态菌剂作为基肥和追肥使用，使用剂量为5-15g/Kg土壤。