[发明专利]一种罗汉果甙Ⅳ含量高的提取物制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物提取领域，尤其是一种罗汉果提取物的制备方法。

背景技术

罗汉果是葫芦科多年生草质藤本植物，为卫生部首批公布的药食两用名贵中药材，被人们誉为“神仙果”。罗汉果营养价值很高，含罗汉果甙类，其中罗汉果甙Ⅴ是罗汉果干果的主要成分，约占干果的0.5%。罗汉果甙Ⅳ含量很少，在果龄30-50天是含量较高，在成熟过程中逐渐消失，在成熟果中基本不含有罗汉果甙Ⅳ。另外含有葡萄糖、果糖、多糖、蛋白质、氨基酸、黄酮甙类、维生素C和多种矿质元素，具有味甘性凉，归肺、大肠经，有润肺止咳，生津止渴的功效，适用于肺热或肺燥咳嗽，百日咳及暑热伤津口渴等，此外还有润肠通便的功效。罗汉果深加工主要是提取罗汉果甙类。中国发明专利申请公开号为CN101007042A，公开了一种脱色、脱苦，含罗汉果甙类的提取物制备方法，但没有提及罗汉果甙Ⅳ含量。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种罗汉果甙Ⅳ含量高的提取物制备方法，通过该方法能够得到一种对丙型肝炎病毒（HCV）有明显的抑制作用的罗汉果提取物，可以作为预防治疗丙肝的药物原料。

为了解决该技术问题，本发明采取的技术方案是：

以30-50 天果龄的新鲜罗汉果为原料，采用超声波提取，膜分离，层析柱、干燥等技术，得到罗汉果甙Ⅳ含量为15-75%的罗汉果提取物。具体工艺流程如下：

罗汉果→磨碎→提取→过滤→滤液→膜分离→吸附分离 →洗脱1→乙醇回收1→树脂脱色→干燥→罗汉果甜甙粗品→水稀释→大孔树脂吸附→洗脱2→乙醇回收2→减压干燥→罗汉果甙Ⅳ含量为15%-75%的罗汉果提取物

所述罗汉果是采用果龄为30-50天的鲜罗汉果，果龄优选35-40天；

所述磨碎是加2倍罗汉果重量的水，用磨碎机磨碎；

所述提取是再加6倍罗汉果重量的20％乙醇溶液，进行超声波回流提取1-2小时；过滤，重复3次，合并得提取液；

所述膜分离将提取液用截留分子量为1000的超滤膜初步浓缩，得到浓缩液1，

所述吸附分离是将浓缩液1注入AB-8吸附树脂柱，弃去柱流出液；吸附完成后，以2倍柱床体积的20％乙醇溶液洗脱至柱流出液为无色；

所述洗脱1是以3.5倍柱床体积的75％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液1。

所述乙醇回收1是将洗脱液1中的乙醇减压蒸发回收得到浸膏；

所述树脂脱色，是将回收乙醇以后的浸膏加入水，经D-280离子交换树脂脱色，将柱流出液减压干燥，得浅黄色产品，即罗汉果甜甙粗品。罗汉果甜甙粗品再用水稀释10-20倍；所述大孔树脂吸附是采再次吸附分离，树脂选用D201，或者HPD100，或者HPD722；

所述洗脱2为选择性洗脱；用70%的乙醇溶液洗脱，洗脱时间为100分钟，收集洗脱液2；将洗脱液2中的乙醇经减压蒸发回收后，得到浓缩液2；也可以是吸附结束后，先控制用70%的乙醇溶液洗脱时间为80分钟，洗脱液另作他用，再用70%的乙醇溶液洗脱，控制洗脱液的洗脱时间为100分钟，收集此次的洗脱液，将此次洗脱液中的乙醇经减压蒸发回收后，得到浓缩液2；此次洗脱以后还可以用70%的乙醇溶液洗脱，洗脱时间为120分钟，收集洗脱液，回收罗汉果甙Ⅴ等物质；

所述减压干燥是将浓缩液2进行减压干燥，得白色或者淡黄色产品，即得罗汉果甙Ⅳ含量为为15%-75%的罗汉果提取物。

所述的磨碎、提取、过滤、膜分离、吸附分离、洗脱、乙醇回收、干燥都为已知技术。

本发明具有下列优点和特性：

1、罗汉果甙Ⅳ含量高。

罗汉果甙Ⅳ在鲜果中含量极低，通过本发明技术方案，罗汉果甙Ⅳ含量能够达到15-75%。

2、组合技术新颖。