[发明专利]一种重组菌落快速检测试剂及其快速检测方法

权利要求书

1.一种重组菌落快速检测试剂，其特征在于：其所述快速检测试剂包括：

（1）试剂A：50-300 mM三羟基甲基氨基甲烷，5-50 mM 乙二胺四乙酸，0.1-1 mg/mL RNA酶A，0.05-0.15% 溴酚蓝；

（2）试剂B：50-300 mM NaOH，0.2-1% SDS，10-30%蔗糖。

2.根据权利要求1所述的重组菌落的快速检测试剂，其特征是该试剂包括：

试剂A： 50 mM三羟基甲基氨基甲烷，10 mM 乙二胺四乙酸，0.1 mg/mL RNA酶A，0.1% 溴酚蓝；

试剂B：200 mM NaOH，0.5% SDS，20%蔗糖。

3.一种使用权利要求1或2所述重组菌落快速检测试剂的重组菌落快速检测方法，其特征在于：依次包括以下步骤：

（1） 待检测菌落悬浮混匀：取6-15 μl试剂A加入到1.5 mL 离心管中，在超净台内用10 μl枪头挑取培养平板上1-2 mm部分待检测菌落，将枪头上挑取的部分待检测菌落在试剂A中反复吹打混匀；

（2） 待检测菌落裂解：加入6-18 μl试剂B，轻柔吹打混匀，避免产生过多气泡，室温放置3-5 mins；

（3） 电泳检测和判断：吸取6-12 μl裂解产物，在1-1.5%琼脂糖凝胶上电泳检测，凝胶成像仪拍照后根据质粒DNA在琼脂糖凝胶电泳时迁移距离的差异，判断是否为重组菌落。