[发明专利]蝼蛄中生物碱类化合物的提取方法及该化合物的应用

权利要求书

1.蝼蛄中生物碱类化合物的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一、取蝼蛄原材料，干燥，粉碎，得到蝼蛄粉，备用；在温度为30-50 ℃条件下，向蝼蛄粉中加入蝼蛄粉重量5-20倍的二氯甲烷脱除虫蜡，经固液分离后，将得到的虫渣风干，再向干燥的虫渣中加入虫渣重量10-20倍的质量浓度为70%的甲醇，在30-50℃条件下，超声辅助提取和过滤，将滤液蒸发浓缩，得到浸膏状物，备用；

步骤二、将步骤一得到的浸膏状物用质量浓度为70%的甲醇溶剂溶解，然后在-4℃条件下冷陈12h，冷陈结束后除去不溶物，并将得到的清液在50℃温度下减压浓缩，得到的浓缩液加入硅胶进行拌样，搅拌均匀后置于通风处干燥，得到拌料样品，备用；

步骤三、取步骤二得到的拌料样品以及拌料样品重量25-30倍的硅胶，先将硅胶装入层析柱，再将拌料样品进行湿法上样，然后依次用体积比为9:1、7:3、1:1、3:7和1:9的氯仿和甲醇的混合溶液进行梯度洗脱，洗脱得到的馏分均采用TLC进行分析，合并相似馏分，共得到的馏分段1-15，备用；

步骤四、将步骤三得到的馏分段5运用常压柱色谱进行分离，梯度洗脱剂依次为体积比为9:1和7:3的氯仿-甲醇溶液，收集馏分，并将馏分在室温下放置，经洗脱剂为7:3的氯仿-甲醇溶液洗脱出的馏分有固体析出，然后将有固体析出的馏分进行过滤，得到固体化合物，固体化合物进一步经环己烷-丙酮重结晶后即得到白色固体粉末，即化合物Ⅱ；

将步骤三得到的馏分段7运用常压柱色谱进行分离，梯度洗脱剂依次为体积比为9:1、7:3和1:1的氯仿-甲醇溶液，收集馏分，并将馏分在室温下放置，经洗脱剂为1：1的氯仿-甲醇溶液洗脱出的馏分有固体析出，将有固体析出的馏分进行离心得到白色固体，将白色固体重结晶后得到白色固体粉末，即化合物Ⅲ；

将步骤三得到的馏分段9运用常压柱色谱进行分离，梯度洗脱剂依次为体积比为9:1、7:3、1:1和3:7的氯仿-甲醇溶液，收集馏分，并将馏分在室温下放置，经洗脱剂为3:7的氯仿-甲醇溶液洗脱出的馏分有固体析出，将有固体析出的馏分进行离心得到白色固体和母液，将白色固体重结晶后得到白色固体粉末，即化合物Ⅳ；将母液放置28h，二次固体析出，经固液分离，得到白色粉末为化合物Ⅴ；

将步骤三得到的馏分段11运用常压柱色谱进行分离，梯度洗脱剂依次为体积比为9:1、7:3、1:1和3:7的氯仿-甲醇溶液，收集馏分，并将馏分在室温下放置，经洗脱剂为3:7的氯仿-甲醇溶液洗脱出的馏分有固体析出，将有固体析出的馏分进行离心得到白色固体，即化合物Ⅰ；

所述的化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ的结构式分别为：

化合物Ⅰ；

化合物Ⅱ；

化合物Ⅲ；

    化合物Ⅳ；

化合物Ⅴ。

2.如权利要求1所述的一种从蝼蛄中提取生物碱类化合物的方法，其特征在于：所述的步骤一中将过滤得到的滤渣重复进行超声辅助提取和过滤，超声辅助提取和过滤共重复操作2次，每次超声辅助提取的时间为18-36 h，然后合并所有滤液进行浓缩。

3.如权利要求1所述的一种从蝼蛄中提取生物碱类化合物的方法，其特征在于：所述的步骤二中质量浓度为70%的甲醇溶剂的用量为浸膏状物重量的3-5倍。