[发明专利]一种单基因缺失粗糙型布鲁氏菌及其疫苗的生产方法有效
| 申请号： | 201410241278.8 | 申请日： | 2014-06-03 |
| 公开（公告）号： | CN104004697A | 公开（公告）日： | 2014-08-27 |
| 发明（设计）人： | 丁家波;王楠;李慧娇;王忠田;王芳;蒋卉;顾进华;宁宜宝;张广川;毛开荣;戴志红;李宁;印春生 | 申请（专利权）人： | 中国兽医药品监察所 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;A61K39/10;A61P31/04;C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京君智知识产权代理事务所 11305 | 代理人： | 郑明 |
| 地址： | 100081 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基因 缺失 粗糙 布鲁氏菌 及其 疫苗 生产 方法 | ||
1.一种单基因缺失粗糙型布鲁氏菌的疫苗生产菌株，其特征在于采用非抗性无痕缺失技术，缺失了布鲁氏菌2308株wboA基因1-897bp之间的序列，构建了能够不干扰布病临床诊断的粗糙型重组布鲁氏菌r2308-ΔWboA株，用该菌制备的布鲁氏菌病活疫苗免疫动物后，其血清可用常规的凝集试验与自然感染相区分，本牛种布鲁氏菌(Brucella abortus)r2308-ΔWboA株已于2014年05月20日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物保藏委员会普通微生物保藏中心，保藏号为：CGMCC No.8885。
2.一种布鲁氏菌病疫苗，其特征在于该疫苗含有活的布鲁氏菌CGMCC No.8885株和兽用生物制品常用的冻干保护剂。
3.如权利要求2所述一种布鲁氏菌病疫苗的制备方法，其特征在于用胰大豆肉汤作为重组菌的培养基，灭菌后按培养基量的按1％～2％接入布鲁氏菌CGMCC No.8885株种子菌液，37℃，按常规方法发酵培养28～38h，加入兽用生物制品常用的冻干保护剂，充分混匀、分装疫苗瓶中后经冷冻真空干燥，即成为单基因缺失粗糙型r2308-ΔWboA株布鲁氏菌病疫苗。
4.一种基因缺失粗糙型布鲁氏菌的鉴别诊断，其特征在于用如序列7和序列8所述序列的一对特异性引物，通过PCR方法可以与非重组的原始菌相区分。
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