[发明专利]具有缩短的Raphanus片段(SRF)的新的芸苔属Ogura恢复系

说明书

发明领域

本发明涉及具有缩短的Raphanus片段的新的芸苔属系，该缩短的Raphanus片段包括用于Ogura细胞质雄性不育的育性恢复基因。本发明还涉及缩短任何植物中包含目的基因的外源插入物的新的育种方法。

发明背景

来自芸苔属(Brassica)植物的含油种子是日益重要的作物。作为植物油的来源，其目前在商业市场容量中只位于大豆和棕榈科之后。油可以用于多种用途，例如沙拉油或烹调油。提取油时，粕可以用作饲料来源。

称为油菜籽的芸苔属种子，在其最初形式时，对人体是有害的，这是由于其油中相对高水平的芥酸和粕中相对高水平的硫代葡萄糖苷。芥酸在天然栽培品种中是普遍存在的，含量为总脂肪酸成分重量的30-50％。硫代葡萄糖苷在芸苔属种子中是不需要的，因为其在油的提取和消化过程中，通过酶的裂解可以导致抗营养物分解产物的产生。植物科研工作者鉴定出低芥酸菜籽油的种质来源，攻克了芥酸问题(Stefansson,“The Development of Improved Rapeseed Cultivars(改良油菜籽栽培品种的培育).”“High and Low Erucic Acid Rapeseed Oils(高芥酸和低芥酸菜籽油)”中(第6章)，由John K.G.Kramer,Frank D.Sauer和Wallace J.Pigden编辑.加拿大学术出版社(Academic Press Canada),多伦多(1983))。最近，植物科研工作者致力于将总硫代葡萄糖苷在含水量8.5％的整粒种子中的含量降低至少于20μmol/g的水平。这可以通过核共振成像(NRI)或高效液相色谱(HPLC)来测定(国际标准化组织，参考号ISO91671:1992)。

特别吸引植物科研工作者的是所谓的“双低(double-low)”品种：该品种油中的芥酸低并且在油提取后残留的固体粕中硫代葡萄糖苷低(即芥酸含量低于总脂肪酸成分重量的2％，并且硫代葡萄糖苷在无油粕中的含量低于30μmol/g)。在加拿大首次培育出的这些更高品质的油菜种类，称为加拿大油菜(canola)。

另外，植物科研工作者已经尝试改善菜籽油的脂肪酸特征(profile)(Robbelen,“Changes and Limitations of Breeding for Improved Polyenic Fatty Acids Content in Rapeseed(油菜籽中改良的多烯脂肪酸含量的育种改变和局限性).”“Biotechnology for the Oils and Fats Industry(用于油类和脂肪产业的生物技术)”(第10章),edited by Colin Ratledge,Peter Dawson and James Rattray(Colin Ratledge、Peter Dawson和James Rattray编辑),American Oil Chemists'Society(美国石油化学家学会),(1984)；Ratledge,Colin,Dawson,Peter和Rattray,James,(1984)(用于油类和脂肪产业的生物技术).American Oil Chemists'Society(美国石油化学家学会),Champaign；328pp；Robbelen and Nitsch.Genetical and Physiological Investigations on Mutants for Polyenic Fatty Acids in Rapeseed,Brassica napus L.(甘蓝型油菜菜籽中多烯脂肪酸突变体的遗传学和生理学调查)Z.Planzenzuchta.,75:93-105,(1975)；Rako and McGregor.“Opportunities and Problems in Modification of Levels of Rapeseed C18Unsaturated Fatty Acids(油菜籽C18不饱和脂肪酸的水平的改变的机遇和问题).”J.Am.Oil Chem.Soc.(1973)50(10):400-403)。这些参考文献是该尝试的代表。