[发明专利]维生素K2及其生物合成酶在制备抗膀胱癌药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药领域，更具体地，涉及维生素K2及其生物合成酶在制备抗膀胱癌药物中的应用。

背景技术

据有关资料报道，膀胱癌是泌尿系统中最常见的恶性肿瘤之一，居恶性肿瘤第九位。膀胱癌分为表浅性和浸润性两大分支，前者80％会出现局部复发，但转移率低于10％，后者有50％—80％会发生转移。

近年来，浸润性膀胱癌的治疗有很大的进展，目前对浸润性膀胱癌的治疗大多采用根治性全膀胱切除及尿流改造术，部分膀胱癌切除等。以手术为主，放疗和化疗为辅，但这些方法存在创伤较大、副作用明显和患者耐受性低等问题。

发明内容

针对现有技术的以上缺陷或改进需求，本发明提供了一种维生素K2及其生物合成酶在制备抗膀胱癌药物中的应用，其目的在于通过测定维生素K2及其生物合成酶的细胞毒性及抗膀胱癌活性，开发一种安全有效的抗膀胱癌药物活性成分。

为实现上述目的，按照本发明的一个方面，提供了维生素K2及其医学上可接受的盐或维生素K2的生物合成酶应用于抗膀胱癌药物的制备。

优选地，所述维生素K2的生物合成酶为UBIAD1蛋白。

总体而言，通过本发明所构思的以上技术方案与现有技术相比，由于维生素K2作为一种天然存在的物质可以直接通过细胞膜被人体吸收，直接发挥作用。同时，因为维生素K2是天然存在的，可以提取，使用成本较低，并且无其他副作用，对人体损伤很小，综合考虑适合于应用于抗膀胱癌药物的制备。维生素K2医学上可接受的盐，经吸收后在体内形成维生素K2，作用效果相同，维生素K2的生物合成酶，如UBIAD1蛋白，经吸收或转染后，能将从植物中吸取的维生素K1转化成为维生素K2，因此具有相似的抗膀胱癌活性。因此维生素K2医学上可接受的盐、维生素K2的生物合成酶，均可应用于制备抗膀胱癌药物

附图说明

图1是实施例1维生素K2抗膀胱癌活性MTT检测结果图:

其中，图1A是T24细胞在不同VK2剂量下24h培养细胞活性图；图1B是T24细胞在不同VK2剂量下48h培养细胞活性图；图1C是J82细胞在不同VK2剂量下24h培养细胞活性图；图1D是J82细胞在不同VK2剂量下48h培养细胞活性图；

图2是实施例1维生素K2抗膀胱癌活性流式细胞仪分析结果图：

其中，图2A是T24细胞在在未处理条件下48h培养细胞凋亡散点图；图2B是T24细胞在25uM VK2剂量下48h培养细胞凋亡散点图；图2C是J82细胞在未处理条件下48h培养细胞凋亡散点图；图2D是J82细胞在25uMVK2剂量下48h培养细胞凋亡散点图；

图3是实施例2中L02细胞在不同VK2剂量下24h培养细胞活性

图4是实施例3中UBIAD1转染膀胱癌T24细胞活性图。

图5是实施例4中UBIAD1转染hek293细胞的活性图

在所有附图中，相同的附图标记用来表示相同的元件或结构，其中：

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及到的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。

现今治疗膀胱癌主要采取手术和化疗，都会对人体产生重大损伤，且术后有复发的危险。为了克服当前治疗膀胱癌的传统方法带来的副作用，本发明提供了一种生物小分子维生素K2及其生物合成酶应用于抗膀胱癌药物的制备，首先对维生素K2及其生物合成酶进行了抗膀胱癌活性实验，然后对维生素K2及其生物合成酶进行了细胞安全性实验。并经过后续研究，解读了维生素K2及其前体抗膀胱癌原理。

维生素K2及其前体抗膀胱癌活性实验，包括以下步骤：

(1-1)将实验用膀胱癌细胞进行体外培养；

(1-2)用不同浓度的维生素K2或其前体处理步骤(1-1)中培养的细胞；

(1-3)统计经不同浓度维生素K2或其生物合成酶处理的细胞的存活率；

(1-4)根据步骤(1-3)的结果，绘制维生素K2或其生物合成酶的抗膀胱癌活性检测结果图。

维生素K2及其生物合成酶细胞安全性实验，包括以下步骤：

(2-1)将实验用体细胞进行体外培养；

(2-1)用不同浓度的维生素K2或其生物合成酶处理步骤(1-1)中培养的细胞；