[发明专利]同时检测呼吸道合胞病毒、腺病毒和人博卡病毒的试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种同时检测呼吸道合胞病毒、腺病毒和人博卡病毒试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括：

特异性扩增呼吸道合胞病毒基因的引物和用于检测呼吸道合胞病毒基因的分子信标探针，所述引物碱基序列如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；所述分子信标探针碱基序列如SEQ ID NO：3所示；

特异性扩增腺病毒基因的引物和用于检测腺病毒基因的分子信标探针，所述引物碱基序列如SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：5所示；所述分子信标探针碱基序列如SEQ ID NO：6所示；

特异性扩增人博卡病毒基因的引物和用于检测人博卡病毒基因的分子信标探针，所述引物碱基序列如SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8所示；所述分子信标探针碱基序列如SEQ ID NO：9所示。

2.根据权利要求1所述的同时检测呼吸道合胞病毒、腺病毒和人博卡病毒试剂盒，其特征在于：用于检测呼吸道合胞病毒基因的分子信标探针的5’端连接有标记荧光基团ROX。

3.根据权利要求1所述的同时检测呼吸道合胞病毒、腺病毒和人博卡病毒试剂盒，其特征在于：用于检测腺病毒基因的分子信标探针的5’端连接有标记荧光基团HEX。

4.根据权利要求1所述的同时检测呼吸道合胞病毒、腺病毒和人博卡病毒试剂盒，其特征在于：用于检测人博卡病毒基因的分子信标探针的5’端连接有标记荧光基团FAM。

5.根据权利要求1-4任一所述的同时检测呼吸道合胞病毒、腺病毒和人博卡病毒试剂盒，其特征在于：还包括呼吸道合胞病毒、腺病毒和人博卡病毒的阳性对照物。

6.根据权利要求5所述的同时检测呼吸道合胞病毒、腺病毒和人博卡病毒试剂盒，其特征在于：所述阳性对照物分别为连有所述呼吸道合胞病毒基因片段的大肠杆菌、连有所述腺病毒基因片段的大肠杆菌、连有所述人博卡病毒基因片段的大肠杆菌。

7.一种同时检测呼吸道合胞病毒、腺病毒和人博卡病毒的方法，包括如下步骤：

提取待测样本RNA；

以所述提取待测样本RNA为模板，采用如权利要求1-6任一所述的同时检测呼吸道合胞病毒、腺病毒和人博卡病毒试剂盒进行RT-PCR处理后收集荧光数据；

将荧光信号检测结果与对照组比较判断。

8.根据权利要求7所述的同时检测呼吸道合胞病毒、腺病毒和人博卡病毒的方法，其特征在于:所述RT-PCR处理的反应体系包括：

9.根据权利要求7或8所述的同时检测呼吸道合胞病毒、腺病毒和人博卡病毒的方法，其特征在于:所述RT-PCR处理的反应条件为：42℃、10min；

95℃、10s；

95℃、5s，60℃、1min，共40个循环；

在60℃退火阶段收集FAM、HEX和ROX荧光数据。