[发明专利]具有降血糖功能的二肽QN及其用途

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一个能与α-葡萄糖苷酶结合，抑制其活性的二肽。

背景技术

血糖的主要来源之一是小肠对碳水化合物的消化吸收，淀粉等碳水化合物经α-葡萄糖苷酶分解成单糖，通过小肠吸收进入血液循环。因此α-葡萄糖苷酶在碳水化合物代谢生成葡萄糖中具有重要作用。α－葡萄糖苷酶抑制剂能通过抑制人体小肠上皮绒毛膜刷状缘上α－葡萄糖苷酶的活性，延缓葡萄糖的生成，在降低餐后血糖中具有重要作用，目前α－葡萄糖苷酶抑制剂已广泛应用于糖尿病治疗中。

降血糖的药物常见的有：

①α-葡萄糖苷酶抑制剂：阿卡波糖、伏格列波糖和米格列醇等。

②胰岛素促进剂：瑞格列奈、那格列奈、格列美脲、格列喹酮等。

③胰岛素增敏剂：二甲双胍、噻唑烷二酮类等。

④胰岛素及其类似物：胰岛素、赖脯胰岛素、门冬胰岛素、赖谷胰岛素等。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种具有降血糖功能的二肽QN及其用途。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种二肽QN，该二肽QN的氨基酸序列为：Gln-Asn。

本发明还同时提供了上述二肽QN在制备降血糖药物中的应用。

作为本发明的二肽QN的应用的改进：制备作为α-葡萄糖苷酶抑制肽的药物。

本发明的二肽QN，能作为α-葡萄糖苷酶抑制肽。

本发明的二肽QN可通过委托吉尔生化(上海)有限公司合成获得。

本发明所报道的二肽序列是针对α-葡萄糖苷酶具有抑制活性，从而表现出具有降血糖功能的特性。

本发明中所涉及的α-葡萄糖苷酶抑制活性的检测方法：

分别取50μL一定浓度的多肽溶液(0.1mol/L，pH＝6.9磷酸缓冲液配置)，100μL10mg/mL的α-葡萄糖苷酶溶液(用0.1mol/L，pH＝6.9磷酸缓冲液配制)，加入酶标板中，混匀后，25℃下放置10min。然后加入50μL5mmol/L的PNPG(对硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷)溶液(用0.1mol/L，pH＝6.9磷酸缓冲液配制)，37℃下培养30min后，加入50μL0.67mol/L的Na₂CO₃溶液终止反应，测定405nm下吸光度。该体系称为样品。

同时设置以下3个体系：对照、样品空白、和对照空白。

对照：以50μL0.1mol/L，pH＝6.9磷酸缓冲液替代50μL的多肽溶液。

样品空白：以100μL的0.1mol/L，pH＝6.9磷酸缓冲液代替100μL10mg/mL的α-葡萄糖苷酶溶液；

对照空白：分别以相应体积量的0.1mol/L，pH＝6.9磷酸缓冲液代替多肽溶液和α-葡萄糖苷酶溶液，抑制率按下式计算。

本发明的优点和积极效果：

该二肽分子可以抑制α-葡萄糖苷酶的活性。

依据本发明所述的氨基酸序列，可委托吉尔生化(上海)有限公司合成，从而获得本发明所述的α-葡萄糖苷酶抑制肽(或简称为二肽QN)。

本发明的α-葡萄糖苷酶抑制肽(或简称为二肽QN)的用法和用量如下：

本发明的二肽为口服型，用量为口服，每次2g，每日2～3次。

具体实施方式

实施例1、

二肽QN在1.0mg/mL的浓度下的α-葡萄糖苷酶抑制活性：

检测方法：将通过化学合成法获得的此二肽QN，进行活性检测(检测方法同上)。此时QN浓度为1.0mg/mL。

结果：二肽QN在1.0mg/mL时的α-葡萄糖苷酶抑制活性为31.8％。

实施例2、

二肽QN在2.0mg/mL的浓度下的α-葡萄糖苷酶抑制活性：

检测方法：将通过化学合成法获得的此二肽QN，进行活性检测(检测方法同上)。此时QN浓度为2.0mg/mL。

结果：二肽QN在2.0mg/mL时的α-葡萄糖苷酶抑制活性为58.5％。

通过实施例1和实施例2中的抑制浓度和活性数据，说明此二肽QN的活性与浓度存在量效关系，此二肽QN具有α-葡萄糖苷酶抑制活性未见报道，属于新的具有α-葡萄糖苷酶抑制活性功能肽。

对比例1、二肽TA(检测方法同上)

二肽TA在1.0mg/mL时的α-葡萄糖苷酶抑制活性为15.2％，在2.0mg/mL时的α-葡萄糖苷酶抑制活性为31.5％。