[发明专利]一种耐油具柄菌及其应用

说明书

技术领域

本发明属于有益菌筛选技术领域，具体涉及一种耐油具柄菌及其应用。

背景技术

目前，抗生素是公认的治疗细菌性疾病的有效方法，传统的抗生素主要通过抑制细胞壁的合成、DNA的复制、RNA的转录以及蛋白质的合成等一些微生物所必需物质的合成或代谢途径，杀死细菌或抑制细菌的繁殖，从而实现对细菌性疾病的治疗目的。这种“生”或“死“的选择性压力，使随机突变产生的抗生素抗性基因得以保留，从而导致抗生素抗性突变的细菌迅速成为微生物群落中的优势种群，进而导致细菌抗药性的产生。而抗生素的滥用进一步加快了细菌抗药性的出现。与此同时新型抗生素的研发速度已经大大降低，往往新型抗生素推广到市场后的几年内就会有相应的抗性细菌出现。这样的现状促使人们开发一种不同于传统抗生素作用机制的新型细菌性疾病治疗手段。其中一种具开发前景的方法被称为抗毒力治疗(antivirulence therapy)，该方法是以细菌的毒力因子本身(毒力因子的表达、功能及运输以及细菌的粘附作用等)为靶位，而不是上述微生物所必需的物质合成或代谢途径，因此从理论上来说能够大大降低其使用过程中对细菌产生的选择性压力从而有效降低产生细菌抗药性的几率。

密度感应(quorum sensing,QS)在1994被首次提出，用来描述夏威夷鱿鱼发光器官中的费氏弧菌(Vibrio fischeri)通过分泌和识别化学信号分子(autoinducers,AIs)来检测种群密度，从而在群体水平上协调其荧光素酶基因(luxABCDE)表达的现象。目前已经报道的信号分子主要有革兰氏阴性菌的N-酰基高丝氨酸内酯分子(N-acyl homoserine lactone，AHL)、革兰氏阳性菌的寡肽分子(autoinducing peptide，AIP)以及在革兰氏阴性和阳性菌中普遍存在的AI-2分子。研究发现，铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora)、弧菌属(Vibrio)和伯克氏菌属(Burkholderia)等多种致病菌中致病因子的分泌和AHL类QS密切相关。另外，生物被膜(biofilm)在致病菌的宿主防御机制以及抗生素的抗药性中起关键作用，它的形成也受QS的调控作用。由于QS系统不是微生物生存所必需的，因此淬灭密度感应(quorum quenching,QQ)可以在不杀死细菌的情况下大大地降低其毒力的表达，同时大大降低环境中的选择压力以及出现细菌抗药性的几率，因此密度感应淬灭技术是极具开发前景的一种抗毒力治疗手段。

目前发现的AHL类的QS系统的密度感应淬灭活性物质主要有信号分子降解酶和QS阻抑小分子物质。小分子阻抑物主要有呋喃酮、肉桂醛及其衍生物和信号分子类似物。动物模型侵染实验表明呋喃酮和肉桂醛等小分子阻抑物能够大大降低哈维氏弧菌和铜绿假单胞菌等致病菌的致病性。目前在很多种细菌中发现了信号分子降解酶，根据降解机制的不同可分为三类：AHL内酯酶(内酯环水解作用)，AHL酰基转移酶(氨基水解作用)以及AHL氧化还原酶(氧化还原作用)。AHL降解酶尤其是AHL内酯酶对不同长度酰基链的信号分子(C4-C12)均具有高效的降解活性。动物实验表明，在毕赤酵母表达系统中过量表达的AHL内酯酶(AiiA)和嗜水气单胞菌混合注射鲤鱼能大大降低鲤鱼的致死率。AHL降解菌株的富集培养液能提高卤虫和大菱鲆的成活率以及增强罗氏沼虾对哈维氏弧菌的抵抗力。因此在防治海水养殖病害方面，密度感应淬灭菌株具有很广阔的发展前景。

目前发现的密度感应淬灭菌大多是来源于陆地，而已发现的25个种海洋细菌中只有边山假交替单胞菌(Pseudoalteromonas byunsanensis)1A01261的QQ酶获得了鉴定。陆地来源的菌株可能会因为不适应海水环境而不宜作为海水养殖的有益菌，因此从海洋或水产养殖动物环境中分离的土著QQ菌株，对密度感应淬灭技术在水产养殖上的应用尤为重要。不仅如此，许多哺乳动物及人类致病菌的毒力也受到QS调控，因此新型高活性的QQ酶具有广阔的药物开发前景。

发明内容

本发明的目的是提供一种耐油具柄菌及其应用，即一种能抑制致病菌毒力因子分泌的密度感应淬灭菌株，从而弥补现有技术的不足。

本发明的耐油具柄菌(Muricauda olearia)LMM001菌株，已于2014年3月28日保藏在位于北京朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.8972。