[发明专利]一种同时定量测定天麻中多种酚类成分含量的方法

权利要求书

1.一种同时定量测定天麻中多种酚类成分含量的方法，其特征在于：主要包括以下三个步骤，

1)对照标准品及供试待测品溶液的制备：将天麻酚类对照标准品及待测天麻提取物分别溶于体积浓度为0-8％的甲醇或乙腈的水溶液中，制备对照标准品混合溶液和待测供试品溶液；

2)以高效液相色谱-荧光检测方法为手段分别进行对照标准品混合溶液和待测供试品溶液成分的定量分析；

通过对一系列不同质量浓度的天麻酚类化合物的对照标准品混合溶液进行分析，获得对照标准品混合溶液中各天麻酚类化合物的保留时间及各天麻酚类化合物不同质量浓度对应的峰面积；

通过对待测供试品溶液的分析，获得待测天麻提取物中天麻酚类化合物的保留时间及对应的峰面积；

3)外标法测定天麻中酚类成分的含量；

通过对一系列不同质量浓度的天麻酚类化合物的对照标准品混合溶液进行分析，以天麻酚类化合物的已知质量浓度和对应的峰面积作为横纵坐标，建立各个已知天麻酚类化合物标准曲线；

以对照标准品混合溶液中各天麻酚类化合物的保留时间为基准，对待测天麻提取物中天麻酚类化合物进行定性，将定性后的待测天麻提取物中天麻酚类化合物的峰面积代入其对应天麻酚类化合物标准曲线中，对其进行定量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1)中天麻酚类对照标准品包括天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛、parishinE、parishinG、parishinB、parishinC和parishin中的二种或三种以上，对照标准品混合溶液中各物质的质量浓度为5-2500ng/ml。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤1)中天麻酚类成分主要包括天麻素、对羟基苯甲醇、parishinB、parishinC和parishin中的二种或三种以上。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1)中以8％甲醇-水为溶剂制备天麻素、对羟基苯甲醇、parishinB、parishinC和parishin对照品混合溶液和制备天麻提取物供试品溶液。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：一系列不同质量浓度是指对照标准品溶液中天麻酚类化合物在质量浓度5-2500ng/ml之间选取5个以上、浓度间隔至少一倍的浓度值。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

步骤2)中：色谱条件为：C18液相色谱柱；流动相为甲醇或乙腈(A)-体积分数0.1～0.5％酸水溶液(B)；梯度程序洗脱；柱温：40～60℃；流速：0.25～0.35ml/min；激发波长215nm～235nm，发射波长295～335nm；进样量1～20μl。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：

步骤2)中流动相为甲醇-酸水溶液，酸优选甲酸，其体积分数为0.5％；

步骤2)中柱温为50℃，流速为0.35ml/min，进样量为1μl；

步骤2)中激发波长为225nm，发射波长为310nm。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：待测供试品溶液中天麻提取物的质量浓度0.01-2mg/ml。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：天麻提取物为天麻的水提物、天麻的乙醇提取物或天麻的乙醇水提取物。