[发明专利]一种天麻的组培快繁方法

说明书

技术领域

本发明属于植物细胞工程技术领域，具体地涉及一种天麻的组培快繁方法。

背景技术

天麻，据《神农本草经》记载，原名叫“赤箭”，最早见于《开宝本草》，在《本草纲目》里称为“定风草”，是著名的中药材。富含天麻素，香荚兰素，蛋白质，氨基酸，微量元素。其性辛、温、无毒，有抗癫痫，抗悸厥，抗风湿；镇静，镇痉，镇痛，补虚，平肝息风的功效。临床应用证明，对血管性神经性头痛、脑震荡后遗症等有显著疗效。

近年来，天麻属药材的市场需求量大幅度增长，但由于土地开发、环境污染及过度采挖等原因，野生天麻属药材资源日益枯竭。人工栽培天麻属药材目前普遍存在产量低、有效成分含量低等问题，严重制约了天麻属药材的产业化发展。

天麻正常的繁殖方式是块茎繁殖、种子繁殖，但由于天麻的种子体积小，采集不便，所以生产上一般采用块茎繁殖。但块茎繁殖效率很低，块茎、种子、珠芽的总繁殖效率约为1:15-1:20。采用传统的块茎繁殖越来越难以满足天麻植物规模化生产的需求。

通过组培快繁，利用优良单株作为扩繁的材料，可获得遗传基础和外观品质形状等重要性状均一的繁殖体，并进一步获得品质均一的原药材，同时通过无性繁殖可有效解决野生变家种过程中的种苗基数问题，保证规模化种植中的优质种苗批量生产问题。

天麻自身缺乏同化外界元素和获得矿质营养的能力。外界矿质营养大部分靠蜜环菌获得，蜜环菌可提供天麻全生育期的营养，天麻吸收矿质营养的关键就是蜜环菌的“泵”作用。经研究，蜜环菌起“泵”作用的物质是带负电荷的氨基酸，且主要是天冬氨酸和谷氨酸。

发明内容

本发明的目的是提供一种天麻的组培快繁方法，该方法可快速高效地大规模繁殖天麻苗，从而移植大田，扩大天麻种植面积，提高天麻的产量和品质，推动天麻产业链的健康发展。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

一种天麻的组培快繁方法，包括以下具体步骤：

⑴培养基配置：基本培养基和其它组培阶段培养基的各组分与每升所含重量为：

基础培养基：用MS培养基，附加蔗糖2-3％，琼脂1-2％，pH5.5-6.0；

愈伤组织诱导培养基：1/2MS添加KT1.0-2.0mg/L、LFS0.2-0.5mg/L、Asp20-100mg/L和Glu50-1000mg/L；

分化培养基：1/2MS添加KT1.0-2.0mg/L、LFS0.2-0.5mg/L、Asp20-100mg/L和Glu100-500mg/L；

增殖培养基：1/2MS添加KT0.5-1.0mg/L、LFS0.1-0.3mg/L、Asp50-200mg/L和Glu200-800mg/L；

生根培养基：1/2MS添加KT1.0-3.0mg/L、LFS0.3-0.5mg/L、Asp100-200mg/L和Glu500-1000mg/L；

⑵外植体选择及处理：取正在生长的天麻，自来水冲洗干净，用70％酒精喷洒一遍，再用0.1％的HgCl₂消毒10min，无菌水冲洗4-5次，在超净工作台上将茎尖切成0.5-1.0cm的小块；

⑶诱导愈伤组织：将处理过的天麻块茎小块接种在愈伤组织诱导培养基上，在温度为23-27℃，光照1800-2300Lx，光暗比为1:1的条件下培养；

⑷分化培养：将步骤⑶诱导形成的愈伤组织移至分化培养基上使其分化出不定芽；

⑸增殖培养：将步骤⑷诱导形成的不定芽移至增殖培养基上再分化，形成原球茎；

⑹生根培养：将步骤⑸增殖形成的原球茎，接种在生根培养基中进行培养；

⑺移栽：当步骤⑹的生根组培苗生长至4-6cm时，移栽入基质，在温室中培养至成苗，炼苗后，直接移植大田。

上述的KT为激动素，是一种细胞分裂素，可调节植物生长。

上述的LFS为灵发素，是一种新型生长调节剂，它同时具有CTK和Auxin两类激素的生物活性。

上述的Asp为天冬氨酸，Glu为谷氨酸。

本发明的有益效果是：本发明可快速高效地大规模繁殖天麻苗，从而移植大田，扩大天麻种植面积，提高天麻的产量和品质，推动天麻产业链的健康发展。

具体实施方式

结合实施例进一步对本发明作阐述，不构成对本发明的限制。

实施例1

一种天麻的组培快繁方法，包括以下具体步骤：

⑴培养基配置：基本培养基和其它组培阶段培养基的各组分与每升所含重量为：