[发明专利]具有高纯度X－染色体和Y－染色体的精子群

权利要求书

1.分离带X-染色体的精子细胞和带Y-染色体的精子细胞的方法，该方法包括如下步骤：

a.从雄性的哺乳动物物种中收集精子细胞；

b.根据测定所述精子细胞的核DNA的量而确定所述精子细胞的性区别特征；

c.通过下述步骤根据所述的性区别特征区分所述精子细胞：(i)针对检测器，定向所述的精子细胞；(ii)检测对精子细胞针对所述检测器的取向具有不同响应特征的光；将对精子细胞的取向具有不同响应特征的光转换成至少一种包含精子细胞的取向信息的信号；和(iii)确定所述精子细胞针对所述检测器的取向；其中，所述检测器包括至少一个光电倍增管，所述光电倍增管具有400伏特到999伏特的典型的操作电压范围，并且所述光电倍增管是在从0伏特到300伏特的范围内操作的；

d.将区分的精子细胞分离成带X-染色体的精子细胞群和带Y-染色体的精子细胞群；并且

e.生产分离的带X-染色体的精子细胞群和带Y-染色体的精子细胞群，每种精子细胞群的纯度大于90％。

2.如权利要求1所述的分离带X-染色体的精子细胞和带Y-染色体的精子细胞的方法，其还包括在权利要求1的步骤b和步骤c之间将所述精子细胞引入液流的步骤，并且其中步骤c还包括：

分析所述液流中夹带的精子细胞；

并且其中步骤d还包括：

形成液滴，所述液滴具有一个被夹带的精子细胞；

根据所述液滴夹带的精子细胞的性区别特征，使每一个液滴带上不同的电荷；

使每一个液滴发生偏转；以及

根据所述液滴夹带的精子细胞的性区别特征，区分收集所述液滴。

3.如权利要求1所述的分离带X-染色体的精子细胞和带Y-染色体的精子细胞的方法，其还包括，在权利要求1的步骤a和步骤b之间对所述精子细胞的核内的DNA进行染色的步骤。

4.如权利要求3所述的分离带X-染色体的精子细胞和带Y-染色体的精子细胞的方法，其还包括，在权利要求1的步骤c(i)和c(ii)之间对所述精子细胞核内的被染色的DNA进行照射的步骤。

5.如权利要求4所述的分离带X-染色体的精子细胞和带Y-染色体的精子细胞的方法，其还包括，在权利要求1的步骤c(i)和c(ii)之间检测经照射的所述精子细胞核内的被染色的DNA所发射的荧光的步骤。

6.如权利要求5所述的分离带X-染色体的精子细胞和带Y-染色体的精子细胞的方法，其中所述的检测经照射的所述精子细胞核内的被染色的DNA所发射的荧光的步骤包括，用光电倍增管生成信号。

7.如权利要求4所述的分离带X-染色体的精子细胞和带Y-染色体的精子细胞的方法，其中对所述精子细胞核内的被染色的DNA进行照射的步骤还包括，对于核长度9μm的牛精子产生具有高度20μm的照射光束的图案。

8.如权利要求2所述的分离带X-染色体的精子细胞和带Y-染色体的精子细胞的方法，其中所述的形成液滴的步骤包括，形成包封所述精子细胞的液滴。

9.如权利要求2所述的分离带X-染色体的精子细胞和带Y-染色体的精子细胞的方法，其还包括，从具有圆形管口的喷嘴中喷出所述液流的步骤，其中所述的管口具有70微米的直径。

10.如权利要求1、3、7或8所述的分离带X-染色体的精子细胞和带Y-染色体的精子细胞的方法，其中所述的带X-染色体的精子细胞群和带Y-染色体的精子细胞群的纯度为选自由90％到100％之间,91％到100％之间，92％到100％之间，93％到100％之间，94％到100％之间，95％到100％之间，96％到100％之间，97％到100％之间，98％到100％之间，99％到100％之间所组成的组。

11.如权利要求1、3、7或8所述的分离带X-染色体的精子细胞和带Y-染色体的精子细胞的方法，其中所述的分离所述精子细胞的步骤包括分离速率，该速率为选自由每秒至少500个分离物，每秒至少1,000个分离物，每秒至少2,000个分离物，每秒至少3,000个分离物，每秒至少4,000个分离物，每秒至少5,000个分离物，每秒至少6,000个分离物，每秒至少7,000个分离物，每秒至少8,000个分离物，每秒至少9,000个分离物，每秒至少10,000个分离物所组成的组。