[发明专利]复合酶法提取黄参多糖的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种黄参多糖的提取方法，尤其涉及一种复合酶法提取黄参多糖的方法。 

背景技术

随着现今社会生活节奏加快，生活压力增加，患高血压、高血糖、高血脂症（并称三高症）的人群日益增长。现今，防治三高症主要依赖于西药，如防治高血压的卡托普利片、复方降压片、清脑降压片等，防治高血糖的主要是注射胰岛素或口服降糖药，防治高血脂症的药物如辛伐他丁、普拉固等。这些药物尽管见效较快，但对肝、肾等脏器损害较大。而纯天然植物提取物类药物具有作用温和、无毒副作用等优点，开发利用潜力很大。 

黄参，又名黄葑，其形似人参，通体金黄。主要生长于沿祁连山、焉支山（又名大黄山）海拔2400～2900米的高寒湿润草原和丘陵地带，是多年生纯天然植物。据《本草纲目》记载，黄参味甘、性温，具有补气养血、滋阴壮阳、通经活络、健胃舒肝之功效。对中老年人胃气虚寒、神疲乏力，妇女气血失调，儿童发育迟缓、营养不良、挑食厌食效果俱佳，被誉为“小人参”。据北京食品研究所、甘肃农业大学等科研单位对山丹天然黄参检测鉴定，它的肉质直根富含人体必需的16种氨基酸、矿物质和钙、磷、铁、锌等微量元素，是一种经济、药用价值极高、纯天然绿色保健食品。黄参多糖（Sphallerocarpus gracilis polysaccha-ride,SGP）是由甘肃特色植物黄参中提取。近年研究证实，黄参多糖对运动时能量补充、激发糖代谢和能量代谢酶系活性有积极作用，同时在提高机体免疫能力及抗疲劳方面也有作用，能够有效地减小四氧嘧啶对胰岛细胞的损伤作用，提高细胞的存活率，促进胰岛素分泌，增强细胞内SOD的活性，降低细胞内MDA的含量。 

专利CN101463094公开了一种黄参多糖制备方法，是将黄参粉碎成0.5cm大小的颗粒后，以水浸泡后煮沸提取，减压真空浓缩提取液，用乙醇静置沉淀，离心过滤去除上清液，收集沉淀物后喷雾干燥即得黄参多糖提取物。黄参多糖提取物的产率为15～30％，采用硫酸-苯酚法测定提取物中多糖含量为72％。《食品工业科技》 2012年09期 “波辅助提取黄参多糖的工艺研究”（杨小舟 张继 杨晓龙 王俊龙 高峰）公开了用微波辅助提取黄参多糖的工艺，首先通过单因素实验选取影响因素与水平，然后在单因素实验的基础上采用三因素三水平的Box-Benhnhen设，依据回归分析确定最佳提取工艺条件为：微波作用时间11.2min，微波功率375W，料液比1︰43g/mL，实多糖得率为11.7%，明显大于常规法得率6.2%。与常规提取方法相比，该方法在多糖得率和提取效率上有了大幅度提高，但是提取得到的多糖含量为68.82%，蛋白质含量为13.1%，虽然提取效率高但得到的产物中多糖含量低。 

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中存在的问题，提供一种复合酶法提取黄参多糖的方法。本发明复合酶法提取黄参多糖的方法，包括以下工艺步骤： 

（1）微波提取：将黄参干燥、粉碎成粉末，过60目筛，以1﹕30～1﹕40 g/mL料液比加水，调节pH =5～7后，于55～65℃、微波功率为200～300W下微波提取8～13min；

（2）复合酶水解：微波提取后，在搅拌下（搅拌速度为800～1200r/min）先用干燥黄参质量1.5%～2.5%的纤维素酶（活力为5 万U/g）水解2～4h，再用干燥黄参质量0.3%～0.5%的木瓜蛋白酶（活力为65 万U/g）水解2～4h，然后于 90～95℃灭酶10～15min，冷却至室温，得提取液；

（3）浓缩、沉淀：提取液离心，取上清液，双层滤纸抽滤1～2次后，减压浓缩至体积为提取液体积的1/4～1/5，再加入体积为浓缩液3～4倍体积量的乙醇，充分搅拌后静置过夜；离心，取下层沉淀，冷冻干燥得黄参提取物。该工艺中，离心速度为4000～4500 r/min，离心时间为10～15min；减压浓缩的工艺条件为：压力0.07～0.09Mpa，温度60～70℃；冷冻干燥的工艺条件为：冷井温度为-60～-70℃，真空度为1～10pa，冷冻时间为5～8h，连续抽真空12～16h。黄参多糖的得率为18.92~21.35%。

本发明地方法是用微波提取后应用纤维素酶能使细胞壁破裂，细胞内物质充分流出，木瓜蛋白酶能使得提取物中的蛋白质从多糖分子上解离下来，从而大大提高了提取物中的多糖含量。用苯酚-硫酸法测定了本发明黄参提取物的多糖含量，测定五次，多糖含量在88.33%±0.93%。用考马斯亮蓝法测定了本发明产品的蛋白含量，测定五次，蛋白含量在2.17±1.03%。