[发明专利]一种黑根霉胞外多糖在制备治疗或预防消化道肿瘤药物中的应用

权利要求书

1.一种黑根霉胞外多糖在制备治疗或预防消化道肿瘤药物中的应用，其特征在于，所述的黑根霉胞外多糖的制备方法如下：

(1)取菌种保藏号为CGMCC NO.8436的黑根霉接种于PDA培养基中，在25～30℃的条件下活化培养3～5d，制得活化后的菌丝；将活化后的菌丝转接于液体培养基中，在25～30℃、100～200rpm/min的条件下培养5～10d，制得发酵液；

(2)将步骤(1)制得的发酵液经固液分离，收集分离后的液体，经浓缩后，在室温条件下，向浓缩液中加入3～4倍体积的体积百分比为95％的酒精，静置后，分离沉淀，将沉淀溶于蒸馏水中，再次分离沉淀，取上清液，制得粗提液；

(3)将步骤(2)制得的粗提液经D301-R型树脂柱脱色，收集洗脱液，然后加入洗脱液体积1/4的Seveage试剂振荡脱蛋白，取上清液，除去有机溶剂，制得粗糖溶液，然后将粗糖溶液经过Sephadex G-50葡聚糖凝胶柱层析纯化，经蒸馏水洗脱，流度为5mL/min，检测合并收集高峰区的多糖洗脱液，将洗脱液进行浓缩、冷冻干燥，制得黑根霉胞外多糖。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述步骤(2)中，浓缩为在55～60℃的条件下经旋转蒸发进行浓缩。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述步骤(2)中，浓缩后浓缩液体积为浓缩前液体体积的三分之一。

4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述步骤(2)中，分离沉淀为在12000rpm/min的条件下离心15min。

5.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述步骤(3)中，Seveage试剂为氯仿与正丁醇按体积比4:1的比例混合制得。

6.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述步骤(3)中，检测为采用苯酚-硫酸法检测糖含量。

7.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的肿瘤药物包括药效成分为黑根霉胞外多糖与环磷酰胺以及药学上可接受的辅料。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的黑根霉胞外多糖与环磷酰胺的质量比为1：(3.5～4)。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，黑根霉胞外多糖与环磷酰胺的质量比为1：3.75。

10.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的消化道肿瘤为胃癌与结肠癌。