[发明专利]八肽胆囊收缩素在制药中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及八肽胆囊收缩素（CCK-8）的用途，具体的说是八肽胆囊收缩素在制药中的应用。

背景技术

胆囊收缩素（cholecystokinin，CCK，PZ），又称缩胆囊素，是从猪小肠提取物中分离出来的、由33个氨基酸组成的多肽，于1928年、1943年被证明并提纯。CCK广泛存在于胃肠道和中枢神经系统，其通过与靶细胞膜上的特异性受体CCKR（cholecystokinin receptor，胆囊收缩素受体）结合而发挥细胞调节作用。CCKR是细胞膜上的一类糖蛋白，属于G蛋白偶联超家族。不同结构类型的CCKR组织分布不同，介导不同的细胞效应。1980年Sankaran等在胰腺腺泡中发现了CCK1R（cholecystokinin 1 receptor，胆囊收缩素1受体），同年在脑中又发现了一种药理学性质完全不同的CCK2R（cholecystokinin 2 receptor，胆囊收缩素2受体）。CCK1R主要分布在外周组织，但也有部分在中枢神经组织分布；CCK2R主要存在于中枢神经组织，但也有部分在外周组织分布。

CCK与其受体结合后发挥多种生理功能。CCK在胃肠道的主要生理作用是刺激胰酶分泌与合成，增强胰碳酸氢盐分泌和胃排空，刺激胆囊收缩与奥狄氏括约肌松弛，还可增加肝胆汁分泌，调节小肠、结肠运动等多方面功能；在中枢神经系统发挥神经递质的作用，参与了痛觉感受、食欲调节、记忆等生理过程，亦有调节垂体激素释放的作用，与惊恐、焦虑、癫痫等病理表现有关，同时，CCK还具有控制中枢呼吸节律及调节心血管紧张的作用。

用胰蛋白酶消化33肽的CCK，可使其羧基端8个氨基酸解裂出来，称为八肽胆囊收缩素（CCK-8），CCK-8具有整个CCK分子的全部活性，是胆囊收缩素-促胰酶素分子的最小活性片段。在CCK分子羧基端第7位的酪氨酸是硫酸盐化的，其上的硫酸酯基团的存在为发挥其生物活性所必需。CCK-8的氨基酸序列为H-Asp-Tyr(SO₃H)-Met-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH₂，分子式为C₄₉H₆₂N₁₀O₁₆S₃，分子量为1143.27。已知可以用作胆囊收缩诊断试剂。

发明内容

本发明的目的在于提供八肽胆囊收缩素的新用途，即在制药中的应用。

本发明的目的是这样实现的：

本发明提供了八肽胆囊收缩素在制备治疗或改善长期使用甲基苯丙胺引起的行为异常药中的应用。

本发明提供了八肽胆囊收缩素在制备治疗或预防甲基苯丙胺引起神经损伤药中的应用。

本发明提供了八肽胆囊收缩素在制备治疗或预防甲基苯丙胺引起的中枢炎症损伤药中的应用。

本发明通过如下药理实验验证了八肽胆囊收缩素在制药领域中所具有的上述新用途。

制备CCK-8注射液：从美国Sigma公司购买硫酸化的CCK-8，用生理盐水将33.7 μL、25%~28%氨水稀释至10 mL，得0.05 mol/L氨水（现用现配）。将5 mg CCK-8与0.05 mol/L氨水5 mL充分振荡混匀，即得1 mg/mL CCK-8溶液，50μL/管分装，冰浴操作，-80℃保存，有效期半年。用前用生理盐水稀释至1 mg/L浓度，避免反复冻融。

1、CCK-8抑制甲基苯丙胺（METH）引起的C57BL/6J小鼠行为敏化

试验动物的准备：

①试验动物：C57BL/6J小鼠（SPF级），体重18~22g，由北京维通利华实验动物有限公司提供。

②饲养条件：小鼠随机分笼饲养，6只/笼，室温22±1℃，湿度50%±10%，光照时间7：00-19：00，食水不限。

③40mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠后，将其固定在小鼠脑立体定位仪上，进行侧脑室埋管手术。手术后适应性饲养（单笼饲养）1周，然后随机分组，每组12只。所有小鼠在实验开始前先预适应3d，并观察记录30min内自发行为活动数据，以作为基础值以及筛除离群个体的依据。

1.1、建立行为敏化模型

行为敏化模型的建立过程分为3个阶段：行为敏化诱导期、行为敏化戒断期与行为敏化检测期。

取准备好的试验动物72只，随机分为6组，每组12只，第1组为对照组，第2~6组为实验组，具体如下：

第1组：生理盐水组（Saline组）；

第2组：METH（1mg/kg）组；