[发明专利]利用基因组原位杂交快速构建黄瓜中期染色体核型方法

权利要求书

1.利用黄瓜基因组原位杂交快速构建黄瓜中期染色体核型方法，其特征在于：

利用黄瓜基因组DNA作为探针，仅通过一次基因组原位杂交(GISH)试验即可对黄瓜有丝分裂中期染色体进行准确地鉴定。

2.根据权利要求1所述的利用黄瓜基因组DNA作为探针，仅通过一次GISH试验即可快速构建黄瓜中期染色体的核型，是通过以下方法获得的：

1)黄瓜基因组DNA是采用CTAB法提取获得，1％的琼脂糖凝胶电泳检测DNA的相对浓度，紫外分光光度计检测基因组DNA的纯度；

2)采用缺刻平移法将黄瓜基因组DNA用Digoxigenin-11-dUTP标上探针，备用；

3)采用4％纤维素酶和2％果胶酶混合液，酶解黄瓜根尖，利用火焰干燥法制作黄瓜染色体制片，镜检，挑选染色体分散度高的制片，备用；

4)将标好的探针杂交到黄瓜中期染色体上，反应12h后，加上带有荧光基团的抗体进行反应1h，高严谨条件洗脱后，利用荧光显微镜检测信号，根据每条染色体信号分布模式的特异性，构建核型。

3.根据权利要求1所述的利用黄瓜基因组DNA作为探针，仅通过一次GISH试验即可快速构建黄瓜中期染色体的核型，是由于不需要利用多个探针以及进行多次重复的杂交，提高了试验效率。