[发明专利]一种N‑乙酰肌肽的合成方法

权利要求书

1.一种N-乙酰肌肽的合成方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

(1)N-2,4,6-三甲氧苄基-β-丙氨酸甲酯的合成：以β-丙氨酸甲酯为起始原料，将2,4,6-三甲氧基苯甲醛与β-丙氨酸甲酯通过乙酸硼氢化钠还原反应得N-2,4,6-三甲氧苄基-β-丙氨酸甲酯；所述的2,4,6-三甲氧基苯甲醛、β-丙氨酸甲酯、乙酸硼氢化钠的质量比的范围1：(1～2)：(2～3)；

(2)N-乙酰N-2,4,6-三甲氧苄基-β-丙氨酸甲酯的合成：将步骤(1)所得N-2,4,6-三甲氧苄基-β-丙氨酸甲酯溶于溶剂中，冰浴下滴加醋酐，滴加温度控制在10℃以下，加完，室温反应12小时，所得反应液加水后用盐酸调到pH为1-2，萃取、干燥、所得油状物即为N-乙酰N-2,4,6-三甲氧苄基-β-丙氨酸甲酯；

(3)N-乙酰N-2,4,6-三甲氧苄基-β-丙氨酸的合成：将步骤(2)所得N-乙酰N-2,4,6-三甲氧苄基-β-丙氨酸甲酯溶于甲醇，加入氢氧化钠的水溶液，反应2小时，然后用HCl调节pH至4后，搅拌有固体析出，所得固体清洗干燥得到N-乙酰N-2,4,6-三甲氧苄基-β-丙氨酸；

(4)N-乙酰N-2,4,6-三甲氧苄基-β-丙氨酰-L-组氨酸的合成：将L-His-OME·2HCL溶解在二甲基甲酰胺(DMF)中，冰浴下，依次加入N,N-二异丙基乙胺(DIEA)、N-乙酰N-2,4,6-三甲氧苄基-β-丙氨酸、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)，室温反应4-6小时，反应液加酸水调pH至2，所得油状物溶于乙醇中，配成(0.03～0.04)g/ml的溶液，加入氢氧化钠，室温反应2小时，然后HCL调节pH至5，得固体N-乙酰N-2,4,6-三甲氧苄基-β-丙氨酰-L-组氨酸；

(5)N-乙酰-β-丙氨酰-L-组氨酸三氟乙酸盐的合成：将三氟乙酸与水按体积比(9～19)：1混合，冰水浴冷却至0℃，加入N-乙酰N-2,4,6-三甲氧苄基-β-丙氨酰-L-组氨酸，然后室温反应2小时，得白色固体N-乙酰-β-丙氨酰-L-组氨酸三氟乙酸盐；

(6)N-乙酰肌肽的合成：将N-乙酰-β-丙氨酰-L-组氨酸三氟乙酸盐溶解于水中，通过强酸性阳离子交换树脂吸附，用去离子水洗去三氟乙酸，用氨水洗脱，收集，浓缩，加异丙醇结晶，得产品。

2.根据权利要求1所述的一种N-乙酰肌肽的合成方法，其特征在于，步骤(1)所述的2,4,6-三甲氧基苯甲醛溶解在有机溶剂中后，再与β-丙氨酸甲酯和乙酸硼氢化钠进行反应，反应温度为室温，反应时间为24h。

3.根据权利要求2所述的一种N-乙酰肌肽的合成方法，其特征在于，步骤(1)所述的有机溶剂为二氯甲烷与三乙胺按体积比300：11的比例进行混合的混合物。

4.根据权利要求1所述的一种N-乙酰肌肽的合成方法，其特征在于，步骤(2)所述的溶剂为体积比为100：14的二氯甲烷和三乙胺的混合物；所述的N-2,4,6-三甲氧苄基-β-丙氨酸甲酯在溶剂中的质量浓度为(0.1～1)g/ml；所述的醋酐的加入量为溶剂体积(0.1～0.2)％。

5.根据权利要求1所述的一种N-乙酰肌肽的合成方法，其特征在于，步骤(3)所述的N-乙酰N-2,4,6-三甲氧苄基-β-丙氨酸甲酯溶于甲醇的质量浓度为(0.1～0.2)g/ml；所述的N-乙酰N-2,4,6-三甲氧苄基-β-丙氨酸甲酯与氢氧化钠的质量比为(2～3)：1。

6.根据权利要求1所述的一种N-乙酰肌肽的合成方法，其特征在于，步骤(4)所述的L-His-OME·2HCL溶解在DMF中得到浓度为(0.06～0.07)g/ml；所述的DIEA与DMF的体积比为1：6；所述的L-His-OME·2HCL、N-乙酰N-2,4,6-三甲氧苄基-β-丙氨酸，HBTU的质量比为4：5：(7～8)；所述的乙醇与氢氧化钠水溶液的体积比为4：3；所述的氢氧化钠水溶液的浓度为4N。

7.根据权利要求1所述的一种N-乙酰肌肽的合成方法，其特征在于，步骤(5)所述的N-乙酰N-2,4,6-三甲氧苄基-β-丙氨酰-L-组氨酸在三氟乙酸与水的混合液中的浓度为(0.05～0.1)g/ml。