[发明专利]咪唑并吡啶-6-甲酰-Met-Phe-OBzl，其合成，抗肿瘤活性和应用

说明书

发明领域

本发公开了3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Phe-OBzl，公开了它的制备方法、涉及它对肿瘤细胞增殖的抑制作用，进一步公开了它对肿瘤生长的抑制作用和对DNA的扦插机制，因而本发明涉及它在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明属于生物医药领域。

背景技术

恶性肿瘤严重威胁人类的健康。在临床肿瘤治疗中，化疗仍然占有最重要的地位。可是，肿瘤多药耐药和交叉耐药使得付出巨大劳动发明的抗肿瘤药物很快丧失疗效。于是，发明具有抗肿瘤和逆转肿瘤耐药的药物一直是抗肿瘤药物研究的前沿。

在抗肿瘤药物研究中，申请人曾经用氨基酸苄酯修饰四氢-β-咔啉-3-羧酸、β-咔啉-3-羧酸及1-位取代的β-咔啉-3-羧酸，包括1-位取代的四氢-β-咔啉-3-羧酸或1-位取代的β-咔啉-3-羧酸制备高效的抗肿瘤化合物。其中下面结构的1-(乙基-AA-OBzl)-β-咔啉-3-羧酸苄酯在8.9μmol/kg剂量下显示了明确的抗肿瘤作用。按照与肿瘤细胞DNA相互作用的结构要求，发明人相信3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Phe-OBzl可以对抗肿瘤作用产生正面影响。在这种思路的引导下，发明人提出了本发明。

发明内容

本发明的第一个内容是提供3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Phe-OBzl。

本发明的第二个内容是提供3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Phe-OBzl的合成方法，该方法包括：

(1)L-组氨酸在稀硫酸催化下与甲醛进行Pictet-Spengler缩合生成6S-4，5，6，7-四氢-3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-羧酸；

(2)6S-4，5，6，7-四氢-3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-羧酸转化为6S-4，5，6，7-四氢-3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸甲酯；

(3)6S-4，5，6，7-四氢-3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酯用高锰酸钾氧化为3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸甲酯；

(4)3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸甲酯在NaOH溶液(2N)中皂化成3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸；

(5)Boc-Met与Phe-OBzl偶联得到Boc-Met-Phe-OBzl；

(6)Boc-Met-Phe-OBzl在4N氯化氢的乙酸乙酯溶液中脱Boc保护基得到Met-Phe-OBzl；

(7)3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸与Met-Phe-OBzl偶联得到3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Phe-OBzl。

本发明的第三个内容是评价3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Phe-OBzl对肿瘤细胞增殖的抑制作用。

本发明的第四个内容是评价3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Phe-OBzl对荷S180小鼠肿瘤增长的抑制作用。

本发明的第五个内容是评价3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Phe-OBzl对DNA的扦插作用。

附图说明

图1.3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Phe-OBzl的合成路线.i)HCHO，H₂O，H₂SO₄，65℃；ii)MeOH，SOCl₂，0℃；iii)DMF，三乙胺，KMnO₄；iv)NaOH，H₂O，0℃；v)二环己基碳二亚胺(DCC)，1-羟基苯并三唑(HOBt)，N-甲基吗啉(NMM)，四氢呋喃(THF)；vi)4N氯化氢的乙酸乙酯溶液；vii)二环己基碳二亚胺(DCC)，1-羟基苯并三唑(HOBt)，N-甲基吗啉(NMM)，DMF。

图2.化合物5与CT-DNA嵌插的粘度变化。

图3.采用固定DNA浓度，，化合物5与CT-DNA之间嵌插的紫外光谱。

图4.采用固定化合物5的浓度，化合物5与CT-DNA之间嵌插的荧光光谱。

图5.化合物5与CT-DNA之间嵌插的荧光光谱。

图6.化合物5与CT-DNA之间嵌插的圆二色散谱。

具体实施方式

为了进一步阐述本发明，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本发明进行具体描述，不应当理解为对本发明的限制。