[发明专利]一种实验室内判断烟粉虱遗传特性的方法

说明书

技术领域

本发明涉及烟粉虱遗传技术研究领域，具体地涉及一种实验室内判断烟粉虱遗传特性的方法。

背景技术

烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)，属半翅目Hemiptera，粉虱科Aleyrodidae，是一种世界性的入侵害虫，由于其猖撅危害而引起的农作物减产绝收及生物多样性破坏等问题，是公认的超级害虫(Barinaga,1993)。在我国，烟粉虱是最具危害的20种入侵生物之一，已知的入侵种烟粉虱主要是B型(即MEAM1)和Q型(即MED)烟粉虱，分别起源于地中海-小亚细亚地区和伊比利亚半岛，两生物型的烟粉虱寄主多达600种，存活率高，抗药性强，传播多种病毒，危害巨大。(万方浩等，2009)。

烟粉虱B.tabaci是处于快速进化中的复合种(Perring,2001)，种下包括至少24个形态上几乎无法区分的隐种，如B.tabaci(Mediterranean/Asia Minor/Africa)(B型和B2型)、B.tabaci(Mediterranean)(Q型、J型和L2型)、B.tabaci(Asia II)(H型、K型、P型、ZHJ1型和ZHJ2型)等(De Barro et al.,2011)。不同隐种非常相像，从形态上无法区分，但它们之间存在不同程度的生殖隔离。Xu等(2010)归纳统计了近20年来世界各地所做的烟粉虱杂交试验，结果发现在已进行的11个隐种之间的杂交试验中。所有隐种之间在生殖上是完全隔离或基本隔离的。Elbaz等(2010)，Wang等(2010,2011)又对更多不同隐种进行了杂交试验和交配行为观察，发现绝大多数情况下都不能产生杂交后代，即使偶尔产生少量杂交后代，也是不育或发育不良的。极其相似近乎相同的形态特征暗示着烟粉虱分化为不同隐种的时间可能并不长，不同隐种间不同的杂交不相容程度代表不同的遗传进化阶段，参与生殖调控相关基因的快速演化或突变是也重要原因之一。因此，不同烟粉虱隐种是研究物种遗传进化机制的绝佳材料。

发明内容

本发明的目的是提供一种实验室内判断烟粉虱遗传特性的方法。

根据本发明的实验室内判断烟粉虱遗传特性的方法包括以下步骤：

(1)采集不同地理种群的烟粉虱，每年4月-10月到野外或温室大棚内采集烟粉虱危害的植物叶片；

(2)准备寄主植物，将棉花裸种撒入花盆，浸种，盆中营养土为草木灰和蛭石配比1:1，置于人工气候箱内设置条件31℃，湿度70％，出苗后将苗移出营养土，清水冲洗苗根，底盒内倒入灭菌后的无土栽培营养液450ml，于无土栽培营养液中继续培养，无土营养液少于1/2时及时补充，3～5天第一片真叶期施用15％多效唑可湿性粉剂，浓度为150mg/l；

(3)烟粉虱杂交及遗传性状分析

(3-1)将一对雌雄各来自不同地理种群的初羽化烟粉虱成虫即亲代F₀代接虫到叶片上，26℃室温、光照明暗度L:D＝14:10条件下饲养；

(3-2)交配产卵3天后，将雌雄成虫分别取出，测定其与待分析遗传性状相关的生物学指标，待40天开始陆续将初羽化的杂交F₁代的子代F₂代吸出，用于测定各项与待分析遗传性状相关的生物学指标；

(3-3)重复步骤(3-1)和(3-2)，其中(3-1)步骤不将F₀亲代取出，待杂交F₁代初羽化后遂将F₁♀与F₀♂进行回交，后代即为回交B₁代，测其生物学指标；同理，杂交F₁♂转移至F₀♀进行回交，得到回交B₂代，同样测其与待分析遗传性状相关的生物学指标；

(3-4)根据狭义遗传力的计算公式