[发明专利]一种提取纯化紫色瓣蕊豆酚的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物领域，具体而言，本发明涉及一种提取纯化紫色瓣蕊豆酚的方法。

背景技术

紫色瓣蕊豆酚（Petalopurpurenol），主要存在于豆科(Leguminosae)紫色瓣蕊豆Petalostemon purpureus Rydb.根中，是一种黄酮醇类化合物，mp92-95℃，分子式：C₂₅H₂₄O₇，分子量：436.46，结构式：

 

现代药理研究表明，紫色瓣蕊豆酚具有细胞毒活性，对BC1、HT、LU1、Mel-2、KB、KB-V(+VLB)、KB-V(-VLB)、A-431、LNCaP、ZR-75-1、U373细胞株的ED50(μg/mL)依次为9.9、7.3、14.8、17.1、18.9、1.0、6.7、11.9、14.8、4.1和13.3。

经文献检索，尚无适用于高纯度紫色瓣蕊豆酚的提取纯化方法报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种适用于规模化生产、产品纯度高的提取纯化紫色瓣蕊豆酚的方法。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

（1）以紫色瓣蕊豆根为原料，进行干燥、粉碎，采用超临界二氧化碳技术萃取紫色瓣蕊豆根中的油脂类物质；

（2）残渣加5-10倍（V/W）75-90%丙酮溶液进行超声循环提取2-3次，每次1-2h，合并提取液；

（3）提取液浓缩后上大孔树脂柱，先用水和40-60%乙醇溶液洗脱，再用85-95%乙醇溶液洗脱，收集85-95%乙醇洗脱液；

（4）洗脱液浓缩，上硅胶短粗柱，柱径高比为1:4-5，以乙酸乙酯-丙酮混合溶液为洗脱剂，收集洗脱液，浓缩，放置结晶；

（5）分出结晶，丙酮-正己烷混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得紫色瓣蕊豆酚。

所述步骤（1）中超临界二氧化碳萃取温度为35-50℃，压力为20-32MPg，萃取时间为0.5-1h。

所述步骤（3）中大孔树脂可选HPD100、ADS-17、D101或HZ801型。

所述步骤（4）中乙酸乙酯-丙酮混合溶液体积比为1:5-15。

所述步骤（5）中丙酮-正己烷混合溶剂体积比为1-1.5:1。

综上所述，本发明存在以下优点：

（1）采用超临界二氧化碳萃取技术脱除油脂类物质，快速、高效。

（2）采用超声循环提取的方法，提取效率高。

（3）采用大孔树脂和硅胶短粗柱层析后进行结晶，，从而获得含量98%以上的紫色瓣蕊豆酚，成本低，分离效果好。

（4）本发明所用试剂乙酸乙酯、丙酮等，可替代通常柱层析采用的氯仿、甲醇，降低毒性和污染。

下面将结合具体实施方式对本发明做进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施例。

具体实施方式

实施例1：

取紫色瓣蕊豆根粗粉500g，采用超临界二氧化碳技术萃取紫色瓣蕊豆根中的油脂类物质，萃取温度为35℃，压力为20MPg，萃取时间为1h，残渣加10倍（V/W）90%丙酮溶液进行超声循环提取2次，每次1h，合并提取液，浓缩后上HPD100型大孔树脂柱，先用水和40%乙醇溶液洗脱，再用85%乙醇溶液洗脱，收集85%乙醇洗脱液，浓缩，与200目的硅胶按重量比1:1拌匀、阴干，上硅胶短粗柱，柱径高比为1:5，以乙酸乙酯-丙酮混合溶液为洗脱剂，依次按1:5、1:10、1:15体积比进行洗脱，收集含紫色瓣蕊豆酚的洗脱液，回收试剂，将所得紫色瓣蕊豆酚浓缩液置于结晶罐中静置20小时使其结晶，过滤，分出结晶，采用丙酮-正己烷（1.5:1）混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得紫色瓣蕊豆酚0.32g，纯度为97.4%。

实施例2：