[发明专利]一种鸡骨草总皂苷的提取方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种生物酶解技术提取鸡骨草中总皂苷的方法。

背景技术

鸡骨草（Abrus cantoniensis ），别名广州相思子、黄头草、黄仔强，是豆科相思子属的一种植物。产湖南、广东、广西。生于疏林、灌丛或山坡，海拔约200米，泰国也有分布。

鸡骨草的化学成分有：全草粗皂苷水解产物含多种三萜类皂苷元：相思子皂醇(abrisapogenol)A、C、B、D、E、F、G，大豆皂醇(soyasapogenol)A、B，葛根皂醇(kudzusapogenol)A，槐花二醇(sophoradiol)广东相思子三醇(cantoniensistriol)，甘草次酸(glycyrrhetinicacid)，光果甘草内酯(glabrolide)。

皂苷（saponin）别称：碱皂体、皂素、皂甙、皂角苷或皂草苷。“皂苷”一词由英文名 Saponin 意译而来，英文名则源于拉丁语的 Sapo，意为肥皂。皂苷（Saponin）是苷元为三萜或螺旋甾烷类化合物的一类糖苷，主要分布于陆地高等植物中，也少量存在于海星和海参等海洋生物中。 许多中草药如人参、远志、桔梗、甘草、知母和柴胡等的主要有效成分都含有皂苷。有些皂苷还具有抗菌的活性或解热、镇静、抗癌等有价值的生物活性。

鸡骨草的药用价值是可以清热利湿，散瘀止痛。主治黄疸型肝炎、胃痛、风湿骨痛、跌打瘀痛、乳痛鸡骨草味甘微苦、性凉，归肝、胆、胃经 。

目前，提取鸡骨草总皂苷的工艺中采用的方法有：溶剂萃取法、溶剂沉淀法和大孔树脂吸附法等。这类方法都是采用传统的提取方法，提取过程单一、鸡骨草总皂苷的出率也比较低。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术的不足和缺陷，提供一种操作简单、提取效率高、污染小的鸡骨草总皂苷的提取方法。

 为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

1）将鸡骨草烘干，粉碎；

2）称取一定量的鸡骨草粉末加水浸润，然后加入鸡骨草粉末重量0.5%-3%的生物酶试剂进行酶解处理，收集酶解原料；

3）然后加入乙醇水溶液回流提取，得到提取液；

4）将提取液过滤，滤渣提取2-3次，合并提取液，减压浓缩至原体积的1/4-1/2，得到鸡骨草总皂苷浓缩液；

5）取上述浓缩液用有机溶剂做两相萃取，收集所需层液减压蒸干，即得鸡骨草总皂苷。

步骤2）中所述的所述的粉末大小为40-60目，粉末与水的质量体积比为0.5-1倍，浸泡时间为30-60分钟，所述的生物酶为纤维素酶、淀粉酶、半纤维素酶和果胶酶中的一种，酶解时的温度设定在30-45℃，酶解时间为2-4小时。

步骤3）中所述的乙醇水溶液浓度为50%-70%，体积为粉末重量的3-6倍。

步骤5）中所述纯化过程为先用石油醚或乙醚中的一种对浓缩液做两相萃取，收集水层，再用正丁醇萃取，收集正丁醇层减压浓缩，干燥，即得鸡骨草总皂苷。

步骤5）中所述浓缩液和有机萃取剂的体积比均为1：2-5。

  采用本法生产鸡骨草总皂苷，将生物酶解技术与溶剂提取法相结合，充分破坏细胞壁，增加和加快了活性成分的流出，通过多次有机溶剂的萃取纯化过程，大大提高了鸡骨草总皂苷的纯度。该工艺简便易操作、提取效率高、污染小、所得产品纯度高、易于实现工业化生产。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取新鲜的鸡骨草烘干 、粉碎，粉末大小为40目。称取鸡骨草粉末50克放入提取器中，加入200毫升的水浸泡30分钟，然后加入1克的生物酶试剂，在温度为40℃的条件下酶解120分钟，收集酶解原料，然后加入250毫升60%的乙醇水溶液回流提取，滤渣提取2次，合并3次滤液，减压浓缩至原体积的1/3，得到鸡骨草总皂苷浓缩液。将鸡骨草总皂苷的浓缩液倒入分液漏斗中，首先加入4倍浓缩液体积的石油醚萃取，收集水层，后改用3倍浓缩液体积的正丁醇继续萃取，收集正丁醇液减压浓缩，干燥，即得总皂苷。经检测总皂苷的含量为92.53%，总皂苷的提取率为58.5%。