[发明专利]一种用于保存犬全血的保存液及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及血液保存技术领域。更具体地，涉及一种用于保存犬全血的保存液及其应用。

背景技术

输血在兽医临床中是常用的急救和治疗措施，血液保存的质量好坏直接影响到输血治疗的效果。随着对血液和相关制品需求的增加，血液的保存越来越受到重视。但是库存血液超过一定储存期限就不再适用于临床，因此，如何提高血液体外保存的质量和期限，便成为一道医学难题。目前国内大多采用半开放式的储存方法，储存时间仅为24小时，而且质量难以保证。1890年瑞士生理学家Arthus和Pages在实验中首次发现血液中加入少许草酸盐或枸橼酸盐可以与钙离子结合而使血液不凝固。1914年比利时人Hustin也发现枸橼酸盐有抗凝作用，并首次提出将枸橼酸盐与葡萄糖混合，以便稀释血液。时隔不久，阿根廷人Agota和美国人Lewisohn也报告用枸橼酸盐抗凝后输血。此后进一步发现葡萄糖能改善红细胞活力，可以延迟输血。经过不断摸索和改进，终于在1943年由Loutit和Mollison配制出酸性枸橼酸盐-葡萄糖（acid-citrate-dextrose solution，ACD)抗凝保存液，不仅彻底解决了输血中的血液凝固问题，而且还能使血液得以保存，这就为血库的建立奠定了基础(Loutit et al, 1943)。

第一次世界大战期间，罗伯逊第一次证明血液存储的可行性，他将全血添加到抗凝剂（柠檬酸）和营养物质(葡萄糖)的混合液中进行保存(Robertson, 1918)。在第二次世界大战期间，血液保存有了进一步的发展。更多的血液和使用较少的抗凝和营养液，使血液中的营养比例接近1:1，红细胞体积分数，储存血细胞比容接近20%。之后第一代现代血液存储解决方案，ACD血液保存液（柠檬酸葡萄糖）出现。ACD血液保存液pH=5.5，通过高温灭菌而不破坏保存液中的葡萄糖。这种保存液相对之前的血液保存方案，可以用更少的ACD保存液保存更多的血液（14mL ACD保存液保存100mL血液）。ACD保存液应用后，各国学者继续探寻延长血液保存，提高血液保存质量的方法。ACD-B和它的后继者柠檬酸-磷酸葡萄糖（CPD），可以将血液储存三周。美国陆军医学研究实验室将腺嘌呤添加到血液保存液中，血液储存可以延长到5周。

各种配方的保存液从原理上分析都是类似的，首先保存液中加入了生物能量物质，保证红细胞能量代谢的顺利进行。此类物质主要代表为葡萄糖。红细胞内糖代谢的意义：ATP的功能，红细胞中的ATP主要用于维持一下几个方面的生理活动：（1）维持红细胞膜上钠泵(Na⁺-K⁺-ATPase)的正常运转，Na⁺和K⁺一般不易通过细胞膜，钠泵通过消耗ATP将Na⁺泵出、K⁺泵入红细胞以维持红细胞的离子平衡以及细胞容积和双凹盘状形态。（2）维持红细胞膜上钙泵(Ca²⁺-ATPase)的正常运转，将红细胞内的Ca²⁺泵入血浆以维持红细胞内的低钙状态。正常情况下，红细胞内的Ca价浓度很低，血浆内钙离子会被动扩散进入红细胞。缺乏ATP时，钙泵不能正常运行，钙将聚集并沉积于红细胞膜上，使膜失去柔韧性而趋于僵硬，红细胞易被破坏。（3）维持红细胞膜上脂质与血浆脂蛋白中的脂质进行交换。红细胞膜的脂质处于不断更新中，此过程需消耗ATP。缺乏ATP时，脂质更新受阻，红细胞可塑性降低，易于破坏。（4）少量ATP用于谷胱甘肽、NAD⁺的生物合成。（5）ATP用于葡萄糖的活化，启动糖酵解过程。其次则是维持适合红细胞生存的晶体和胶体物质，保持合适的渗透压，稳定红细胞的膜结构，如甘露醇，氯化钠等。还有肌苷与磷酸盐主要能维持或提高2，3- DPG水平，起到保护细胞膜和酶活性的目的。腺嘌呤对维持和恢复ATP、DPG水平及红细胞的活性起了重要作用。