[发明专利]FBXO31基因及其相关产物在制备胃癌诊断试剂中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及FBXO31基因及其相关产物在制备胃癌诊断试剂中的应用，属于生物工程技术领域。

背景技术

胃癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，其死亡率位居肿瘤相关死亡的第二位。根据2008年的统计数据，胃癌发生率占癌症总发生率的8％，而胃癌死亡率占癌症相关死亡的10％。东亚是胃癌发病率最高的区域，特别是中国。由于在胃癌的早期阶段很难以被诊断，导致大多数患者在发现时就到了晚期或转移性阶段。利用传统的手术治疗，化疗或放疗在改善胃癌患者的生存率方面没有太大的意义。因此，关键是寻找新的诊断或预后标志物和治疗靶标，以提高胃癌患者的存活率。

FBXO31属于F-box家族，含有F-box结构域的蛋白质参与Skp1-Cullin-F-box(SCF)E3泛素连接酶复合体的组成，介导泛素-蛋白酶体依赖的降解途径，进而调控细胞内的信号转导，细胞周期进程，中心体的稳定性等。根据除F-box结构域之外的其他结构域的组成可将F-box蛋白被分为三大家族。FBXW含有WD40重复序列；FBXL含有富含亮氨酸重复序列和FBXO包含其他序列。FBXO31属于FBXO组。

FBXO31位于染色体16q24.3，在神经元的发育，DNA损伤修复反应和肿瘤发生等过程中起到了至关重要的作用。FBXO31最初被认为是一种候选抑癌基因，研究发现FBXO31在乳腺癌中表达水平显著降低，在乳腺癌细胞中过表达FBXO31后可抑制细胞的克隆形成及细胞增殖，诱导细胞衰老和G1期细胞周期阻滞。此外，与正常肝组织相比，FBXO31在肝癌中的表达水平也显著降低，但在食管鳞状细胞癌(鳞癌)中FBXO31却得到相反的结果。KOGO等人表明，FBXO31表达水平越高，肿瘤的侵袭能力越强、临床分期级别越高，愈后越差。从这些结果来看，FBXO31在肿瘤发生发展中的作用还存在争议。目前还不清楚FBXO31在胃癌中的表达水平和功能如何，以及它在胃癌中是如何被调控。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供FBXO31基因及其相关产物在制备胃癌诊断试剂中的应用。

本发明技术方案如下：

FBXO31基因及其相关产物在制备胃癌诊断试剂中的应用，所述的FBXO31基因相关产物为FBXO31基因的剪切体、FBXO31基因的反义寡核苷酸、FBXO31基因的mRNA、FBXO31基因编码的蛋白、FBXO31基因编码的蛋白的抗体、FBXO31基因的小干扰RNA或靶向FBXO31基因的小分子RNA的抑制物中的一种或两种以上的组合。

根据本发明优选的，所述的靶向FBXO31基因的小分子RNA的抑制物为靶向FBXO31基因的miR-20a和miR-17的抑制物；miR-20a的抑制物核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，miR-17的抑制物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

根据本发明优选的，上述miR-20a抑制物和miR-17的抑制物作为胃癌诊断试剂中的有效成分。

根据本发明优选的，所述的miR-20a抑制物和miR-17的抑制物是人工合成的。

根据本发明优选的，FBXO31基因的小干扰RNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。

根据本发明优选的，所述的FBXO31基因编码的蛋白的抗体是针对的氨基酸序列为SEQ ID NO.5所示的肽段。

根据本发明优选的，所述的FBXO31基因的蛋白是天然分离得到的或人工合成的。

根据本发明优选的，所述的FBXO31基因的mRNA是天然分离得到的或人工合成的。

有益效果

本发明首次发现了FBXO31表达在胃癌组织中显著降低，该现象与胃癌进展密切相关，并找到了调控FBXO31基因的表达的小分子RNA miR-20a和miR-17，发现调控FBXO31基因的表达的小分子miR-20a和miR-17的过表达引起FBXO31在胃癌中的表达降低，从而提供了一种诊断胃癌的新思路，为研发胃癌诊断试剂提供了新途径。

附图说明

图1FBXO31基因在胃癌组织中的表达水平的检测结果；

图1A为用RT-PCR方法检测胃癌标本中FBXO31的mRNA水平的结果图；

图中：N：癌旁正常组织，T：胃癌组织，β2-M：内参。

图1B为用qRT-PCR的方法检测53对胃癌标本中FBXO31的mRNA表达水平的统计图；