[发明专利]一种推断人体死后间隔时间的方法

说明书

技术领域

本发明涉及医学检验领域，特别涉及一种推断人体死后间隔时间的方法。

背景技术

人体死后间隔时间(postmortem interval，PMI)推断一直是法医病理学研究的重点、难点和热点之一，尤其早期PMI的推断，在刑事侦查中排查犯罪嫌疑人、仲裁死亡医疗纠纷等司法实践中更具现实意义。客观、准确的早期PMI推断，可为公安机关刑事侦查提供重要的客观线索，有利于公安机关辨别犯罪嫌疑人是否有作案时间，确定或缩小侦查范围，提高侦查效率和准确度。此外，死后间隔时间的推断有时对自然灾害的评估分析、保险和财产继承也至关重要。

DNA是具有显著生化稳定性的遗传物质，同物种不同组织的体细胞的DNA含量是恒定的。在机体死亡后，细胞组织发生缺血、缺氧，随着氧自由基生成增多，细胞自身消化，其结构进行解体，DNA也逐渐发生降解，其DNA的含量及细胞核的形态变化亦具规律性，表现为核凝固、边集、碎裂、溶解等改变。研究人员在研究死后间隔时间时，其研究对象均为脑细胞、脾细胞或肝细胞，且研究人员均认为仅在脑细胞、脾细胞或肝细胞中的DNA能够准确反映死后间隔时间。

发明内容

为了解决现有技术中没有针对胆囊反映死后间隔时间的问题，本发明实施例提供了一种推断人体死后间隔时间的方法。所述技术方案如下：

本发明提供了一种推断人体死后间隔时间的方法，所述方法包括：

提取不同死亡时间的人的胆囊粘膜上皮细胞作为样本，并将所述样本涂片；

将涂片后的所述样本进行染色；

对染色后的所述样本进行图像分析，所述分析的参数包括：所述胆囊粘膜上皮细胞的细胞核的异形指数、灰度参数和几何参数，所述灰度参数包括平均光密度、平均灰度和积分光密度；

将所述参数进行统计，获得所述参数的线性回归方程，所述线性回归方程为：

Y_ID＝11.333X_ID-33.338，其中，Y_ID为推断的死后间隔时间，X_ID为对应测量的异形指数；

Y_AG＝0.679X_AG-54.277，其中，Y_AG为推断的死后间隔时间，X_AG为对应测量的平均灰度；

Y_AOD＝-178.868X_AOD+84.222，其中，Y_AOD为推断的死后间隔时间，X_AOD对应测量的平均光密度；

Y_IOD＝-6.422X_IOD+91.398，其中，Y_IOD为推断的死后间隔时间，X_IOD为对应测量的积分光密度；

根据所述线性回归方程中的一个或多个确定死后间隔时间。

具体地，所述样本剪取自所述人死后5～36h的所述胆囊粘膜上皮细胞。

进一步地，所述涂片的方法为：将取出的所述样本置于含有400mg/L的庆大霉素的生理盐水中，首次剪取所述样本的时间在所述人死后5h完成，在18℃恒温箱中存放0.5h，然后在保湿盒内，剪取0.5cm×0.5cm×1cm所述样本1份，且每隔1h剪取一次，将剪取的所述样本浸于清水中洗涤，取出所述样本并用滤纸吸干，将吸干后的所述样本涂布。

进一步地，将涂布后的所述样本采用孚尔根染色方法进行染色。

具体地，所述孚尔根染色方法包括：将备染的所述涂片浸入固定液中固定0.5h，取出后置于6N盐酸溶液中水解30min，取出后置于蒸馏水中洗涤，再浸入由副品红配制的席夫氏试剂中放置30min，用浓度为0.5％的偏重亚硫酸钠溶液浸洗2min，重复浸洗三次，流水冲洗5min后，进行封片。

进一步地，所述固定液为卡诺氏固定液。

具体地，所述图像分析采用彩色病理图像分析系统。

进一步地，在显微镜高倍物镜下摄取染色后的所述涂片的图像视野，以“弓”字型的形状作为采集线路，保证采集的图像无重复、无交叉，且每张所述涂片随机取10个视野，每个视野采集一幅图像。

进一步地，所述几何参数包括面积、平均直径、等效直径和周长。