[发明专利]TaqMan实时荧光定量PCR检测杆菌样巴尔通体的方法

权利要求书

1.用于检测杆菌样巴尔通体的TaqMan实时荧光定量PCR引物及探针，其特征在于，

所述引物包括：

上游引物Bb2F：5′-CAATTATCATCATTATTTGCTCCTGG-3′

下游引物Bb2R：5′-TACTGCTGAGGTTGGGCGA-3′

所述探针为：

探针BbT：5′-F-AGAAGACGATCCGTTACAT-Q-3′

其中，F为荧光报告基团，Q为荧光淬灭基团。

2.根据权利要求1所述的引物及探针，其特征在于，所述荧光报告基团为FAM，所述荧光淬灭基团为MGB。

3.含有权利要求1所述引物及探针的用于TaqMan实时荧光定量PCR检测杆菌样巴尔通体的试剂盒。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括dNTPs、Taq DNA聚合酶、Mg²⁺、PCR反应缓冲液中的一种或多种。

5.根据权利要求3或4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括标准阳性模板。

6.TaqMan实时荧光定量PCR检测杆菌样巴尔通体的方法，其是利用权利要求1或2所述引物及探针，或权利要求3-5任一项所述试剂盒对杆菌样巴尔通体进行TaqMan实时荧光定量PCR检测。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)提取样品组织中的总DNA；

2)以步骤1)中的总DNA为模板，Bb2F和Bb2R为引物，BbT为探针，进行PCR扩增反应；

3)分析PCR产物。

8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，PCR反应体系以20μl计为：

9.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，PCR反应条件为：95℃2分钟，单个循环；95℃3秒，60℃3秒，共40个循环。