[发明专利]慢性心力衰竭心气虚兼血瘀水肿证动物模型的构建方法

权利要求书

1.慢性心力衰竭心气虚兼血瘀水肿证动物模型的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括以下步骤：

(1)取清洁级成年雄性SD大鼠，将大鼠置于净化笼中，温度为19-23℃，相对湿度40％-50％，自然采光，以大鼠标准饲料进行饲喂，自由饮水；

(2)适应性饲喂1周后，以每日所给饲料重量的0.1％-0.3％的阿霉素进行灌胃；并以2-5mg/kg进行腹腔注射丙基硫氧嘧啶，每周1次；连续6周即得。

2.根据权利要求1所述的慢性心力衰竭心气虚兼血瘀水肿证动物模型的构建方法，其特征在于，所述阿霉素以每日所给饲料重量的0.2％进行灌胃；丙基硫氧嘧啶以3.5mg/kg进行腹腔注射，每周1次。

3.根据权利要求1或2所述的慢性心力衰竭心气虚兼血瘀水肿证动物模型，其特征在于，所述动物模型建模完成后，采用以下评价指标对动物模型进行评价：左室射血分数、左室内径缩短率、心率；心肌病理切片、心重指数；呼吸频率、肺重指数、肺脏病理切片；尿量；肝重指数、肝脏病理切片；力竭性游泳试验；耳温、血清BNP、T3、T4、TSH；上述评价指标均采用盲法检测；

所述评价的具体方法如下：

(1)在建模前、后分别测量大鼠左室射血分数、左室内径缩短率、心率、呼吸频率、尿量、耳温和力竭性游泳实验；

(2)建模结束后，腹主动脉取血后，分离血清，并在-80℃的条件下保持，剖取心脏、肺脏、肝脏，洗去残血，滤纸吸干，称量后计算出心重指数、肺重指数、肝重指数；

(3)取少量左室肌、肺脏、肝脏标本，福尔马林固定，HE染色后，采用盲法在显微镜下观察并镊片，通过ELISA法检测血清BNP、T3、T4、TSH；

若与建模前相比，建模后大鼠左室射血分数减少率大于等于50％，左室内径缩短率减少率大于等于50％，心率增加量大于等于50次/分，呼吸频率增加量大于等于20次/分，尿量减少量大于等于4ml/24h，耳温降低量大于等于0.5℃，力竭性游泳试验的时间减少量大于等于55min；

若建模后，大鼠血清BNP含量大于等于70hg/L，T3含量小于等于43.5ng/ml，T4含量小于等于60ng/ml，TSH含量大于等于25ng/ml；

若建模后，心重指数至少为5.5g/kg、肺重指数至少为5.5g/kg、肝重指数至少为30g/kg；

同时满足上述条件，则慢性心力衰竭心气虚兼血瘀水肿证的动物模型建模成功。

4.根据权利要求1-3任一项所述的慢性心力衰竭心气虚兼血瘀水肿证动物模型，其特征在于，所述左室射血分数、左室内径缩短率均采用Teichholz法测量；心率采用无创套尾法监测。

5.根据权利要求1-4任一项所述的慢性心力衰竭心气虚兼血瘀水肿证动物模型，其特征在于，所述呼吸频率的测量方法为上午8-10点熟睡时，记录20s呼吸次数，最终结果乘以3。

6.根据权利要求1-5任一项所述的慢性心力衰竭心气虚兼血瘀水肿证动物模型，其特征在于，所述尿量的检测方法为：统一灌胃5ml水后，收集24小时代谢笼尿液。

7.根据权利要求1-6任一项所述的慢性心力衰竭心气虚兼血瘀水肿证动物模型，其特征在于，所述力竭性游泳的方法为：大鼠连续反复下沉，沉入水下三次，每次超过5s时间，至力竭为止，统计游泳的总时间。