[发明专利]一种超高效液相-质谱法检测血液中降血糖以及降血压药物的方法

权利要求书

1.一种超高效液相-质谱法检测血液中常见降血压、降血糖药物的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)的多反应监测(MRM)模式，针对所选定的降血压、降血糖药物进行分时间段初筛检测。

2.根据权利要求1的方法，其特征在于，所述方法还包括对上述步骤中初筛检测阳性样本进行复核的步骤，其中，所述复核步骤针对筛查检测阳性样本，进行超高效液相-质谱法检测。

优选地，所述复核步骤中，以保留时间、两对母离子/子离子对(优选还包括以丰度比和/或响应值增加进行复核。更优选地，所述复核步骤中，对于初筛检测阳性样本，在样品预处理后，进行UPLC-MS/MS检测，以保留时间、两对母离子/子离子对(优选还包括以丰度比和/或响应值)增加进行复核。

优选地，所述方法还包括对上述复核后的样本进行复检的步骤。更优选地，通过采用高效液相-高分辨飞行时间串联质谱法(HPLC-QTOF)进行复检。

更优选地，所述复检步骤中，采用高效液相-高分辨飞行时间串联质谱法(HPLC-QTOF)进行复检，以保留时间、精确分子量和/或同位素峰丰度比进行确认。

3.根据权利要求1或2的方法，其特征在于，所述初筛检测法步骤中，以保留时间、一对母离子/子离子对进行筛查分析。

优选的液相条件为：ACQUITY UPLC HSS C18柱(1.8μm×2.1mm×150mm)，流动相为含0.1％甲酸的5mM乙酸铵水溶液-含0.1％甲酸的乙腈溶液(60:40)，流速0.2mL/min；柱温30℃；质谱条件为：离子源：ESI+，离子源温度120℃；去溶剂化温度350℃；正离子方式检测；扫描方式：多反应监测(MRM)；液氮气体流速650L/hr，毛细管电压(capillary)3.0KV。

优选地，所述初筛检测分时间段检测。更优选地，所述步骤中的分段检测可以分为6个时间段，优选可以为5个时间段，或者4个时间段。还更优选地，所述步骤中的检测时间段分为：0-2分钟，2-4分钟，4-6分钟，6-8分钟，8-10分钟，10分钟以后，优选只检测到10分钟。或者检测时间段分为：0-2.5分钟，2.5-5分钟，5-7.5分钟，7.5-10分钟，10分钟以后，优选只检测到10分钟。或者检测时间段分为：0-3分钟，3-6分钟，6-9分钟，9分钟以后，优选只检测到9分钟。

4.根据权利要求1-3任一项的方法，其特征在于，所述药物为选自如下的31种药物：

11种降糖药物：二甲双胍、格列美脲、瑞格列奈、格列喹酮、罗格列酮、西他列汀、吡格列酮、格列吡嗪、格列齐特、格列本脲、那格列奈；

19种降压药物：氨氯地平、厄贝沙坦、硝苯地平、培哚普利、吲哒帕胺、依那普利、拉贝诺尔、尼卡地平、拉西地平、尼群地平、非洛地平、福辛普利、坎地沙坦酯、贝那普利、缬沙坦、维拉帕米、氯沙坦、阿替洛尔、地尔硫卓；

1种降脂药：阿托伐他汀。

5.权利要求1-4任一项的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)检测目标化合物的确认

设定31种药物作为检测目标化合物，分别是：

11种降糖药物：二甲双胍、格列美脲、瑞格列奈、格列喹酮、罗格列酮、西他列汀、吡格列酮、格列吡嗪、格列齐特、格列本脲、那格列奈；

19种降压药物：氨氯地平、厄贝沙坦、硝苯地平、培哚普利、吲哒帕胺、依那普利、拉贝诺尔、尼卡地平、拉西地平、尼群地平、非洛地平、福辛普利、坎地沙坦酯、贝那普利、缬沙坦、维拉帕米、氯沙坦、阿替洛尔、地尔硫卓；

1种降脂药：阿托伐他汀；

(2)样品处理：采用有机溶剂沉淀蛋白法处理样品；

(3)初筛检测：采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)的多反应监测(MRM)模式分时间段进行初筛检测；

(4)对步骤(3)中初筛检测阳性样本进行复核：对于筛查检测阳性样本，处理浓缩后进行UPLC-MS/MS检测；任选地，和

(5)对步骤(4)中复核检测阳性样本进行复检，可以采用高效液相-高分辨飞行时间串联质谱法(HPLC-QTOF)进行复检。