[发明专利]一种干花豆组培苗的培育方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物的组织培养技术，具体涉及一种干花豆组培苗的培育方法。

背景技术

干花豆(Fordia cauliflora Hemsl)为豆科蝶形花亚科干花豆属植物，又名野京豆、水罗伞、土甘草、虾须草、玉郎伞等。干花豆的花期在5～9月，果期在6～11月，其荚果呈棍棒状，扁平，长7～10cm，宽2～2.5cm，革质，顶端截形，具尖喙，基部渐狭，被平伏柔毛，后渐秃净，有种子1～2粒；种子呈圆形，扁平，宽约1cm，棕褐色，光滑，种阜膜质，包于珠柄。干花豆性辛、平，味甘、微酸，无毒，具有散淤消肿、止痛宁神、润肺化痰等功效。在广西壮、瑶族中用于风湿骨痛、跌打损伤、骨折、小儿痴呆、小儿疳积、肌痿症、体虚及产妇身体复元等症。现代药理学研究表明，干花豆具有抗炎、抗氧化、抗衰老、提高记忆力等作用。

目前，干花豆的采集主要以野生为主，随着人们的采伐，近些年来干花豆的野外生长面积逐步缩小，在很大程度上限制了干花豆作为药用植物的利用。现有干花豆的人工栽培方式主要是采用来自于野生植株驯化所产生的种子进行播种，首先，这种方式存在种子不易萌发、幼苗易受病虫害等问题；其次，这种方式难以大批量生产，无法满足现代规模化种植的需求。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种干花豆组培苗的培育方法。该方法简单易操作，可实现大批量生产，培育得到的干花豆组培苗无菌无毒，移栽后成活率高。

本发明所述的干花豆组培苗的培育方法，包括以下步骤：

1)取干花豆种子经消毒处理后接种于无菌芽苗培养基中，光照培养，得到萌发的干花豆幼苗；其中，在培养过程中，每5～7天更换一次无菌芽苗培养基；所述的无菌芽苗培养基配方为：1/2MS+GA31.0～2.0mg/L+蔗糖25～35g/L+NAA1～3mg/L+琼脂4～8g/L；

2)选取生长健壮的干花豆幼苗，分切成带腋芽单节茎段；

3)将分切得到的带腋芽单节茎段接种于诱导培养基中，光照培养，直至长出淡黄色或乳白色幼苗组织；所述的诱导培养基配方为：MS500～800mg/L+2,4-D2.0～4.0mg/L+椰子汁200～500mg/L+活性炭500～1000mg/L+琼脂500～600mg/L，pH5.8～6.2；

4)将所得幼苗组织切成块状，接种于生芽培养基中，光照培养，得到干花豆丛生苗；所述的生芽培养基配方为：1/2MS+6-BA2～10mg/L；

5)将所得干花豆丛生苗分株，移植于生根培养基中，光照培养，得到干花豆生根苗；所述的生根培养基配方为：1/4MS+IBA4～8mg/L+NAA1～2mg/L；

上述各步骤中，所述光照培养的培养条件为：温度：昼/夜27±2/17±2℃；光照周期：昼/夜16～20h/8～4h；光照强度1500～2000lx。

上述所述的培育方法中，

步骤1)中，优选是选取色泽鲜亮、充实、饱满的干花豆种子，该所述的干花豆种子可以是野生植株的种子，也可以是经野生植株驯化所得植株所产生的种子，优选是采用人工授粉发育成熟的干花豆种子，具体地，可以选取生长健壮的5年生以上的干花豆母株，在开花时进行人工授粉，在10～12月份，选取人工授粉发育至基本成熟但是还未开裂的干花豆荚果种子。采用人工授粉发育成熟的干花豆种子可以进一步提高种子授粉率，从而有利于后续干花豆幼苗的萌发率。该步骤中，所述的无菌芽苗培养基配方优选为：1/2MS+GA31.5mg/L+蔗糖30g/L+NAA2mg/L+琼脂5g/L。该步骤中，通常是对干花豆种子进行常规的消毒处理，具体的消毒处理可按下述方法进行：取干花豆种子流水冲洗20～30min，在超净工作台上用70～75％(体积)的乙醇浸泡30s，无菌水清洗3～5次，在0.1～0.3％(质量)的升汞中浸泡8～10min后，取出，用蒸馏水冲洗3次。申请人发现，在该步骤中的光照培养过程中，通过每5～7天更换一次无菌芽苗培养基的操作不仅可以使干花豆幼苗更快、更好地萌发，而且萌发得到长势更为健壮的干花豆幼苗。