[发明专利]一种同步高效制备川明参蛋白和多糖的方法

说明书

技术领域

本发明属于食品加工技术领域，具体涉及一种从川明参中同步超声波辅助提取蛋白和多糖的方法。 

背景技术

川明参又名明参、明沙参、土明参，是伞形科(Umbelliferae)植物川明参属 “chuanminshen violaceum Sheh et Shan”的根，是我国特有的单种属植物，是四川产道地药材。主产区为四川（青北江、金堂、简阳、苍溪、威远、北川、平武、巴中、南川）、湖北（宜昌、当阳）等地。具有滋阴补肺，健脾等功效，主治热病伤阴，肺热咳嗽，脾虚食少，病后体弱。川明参中含有多糖、蛋白质、香豆素、萜类、甾醇、类脂、苷类、游离有机物或酚性化合物和鞣质等成分。川明参中多糖含量最高，高达80%以上，具有抗突变作用，镇咳、祛痰，免疫调节作用，抗疲劳、抗氧化作用以及抗病毒作用等。粗蛋白含量高达5%以上，其水解氨基酸总含量超过3%，各类氨基酸达13种以上，尤其是人体必需的7种氨基酸，占总氨基酸含量的40%以上，它们可能是川明参的主要功能成分之一。可广泛应用于医药和保健食品领域，市场前景广阔，因此高效提取川明参蛋白和多糖具有重要意义。 

目前，川明参多糖和川明参蛋白多数被单独提取，但由于川明参中的蛋白的总量较低，单独提取必然增加产品开发的成本。而川明参多糖含量较高，可分类提取，采用碱提法，可以将川明参蛋白和碱性多糖同时提取出来，剩余残渣仍可用于提取水溶性多糖。而用95%乙醇提取川明参有效成分后的残渣含有大部分多糖及几乎全部的蛋白，因此，以95%乙醇提取川明参有效成分后的残渣为原料，采用超声波辅助碱提法同步提取川明参中蛋白和多糖有利于川明参资源综合利用和进一步开发。 

我国工业提取分离蛋白质和多糖主要采用碱提酸沉和水提（碱提）醇沉的方法，目前除了研究更多新的分离方法外，各种辅助分离技术逐渐受到人们的重视，超声波在化学领域的广泛应用使其在应用于各种组分分离中显示了许多突出优势。本发明在碱提酸沉法结合水提（碱提）醇沉法的基础上，采用超声波辅助提取法对川明参渣中蛋白和多糖进行同步提取，并对提取工艺进行优化，最终确定最佳工艺条件。 

发明内容

为解决以上技术问题，本发明提供一种简单、高效的从川明参渣中同步提取蛋白的有效方法。 

本发明采用以下技术方案来实现：                         

在结合碱提酸沉和碱提醇沉的基础上采用超声波辅助法方法从川明参中同步提取川明参蛋白和多糖。

本发明川明参蛋白和多糖的制备方法如下： 

将乙醇提取后的川明参渣石油醚索氏回流脱脂2次，每次6小时，50℃恒温烘干至质量恒定，粉碎，过80目筛。

取适量上述川明参粉，碱溶均匀，超声提取，离心，二次超声提取，合并上清液，酸沉，离心得沉淀物和上清液，取沉淀物，醇洗，水洗，真空冷冻干燥，得川明参蛋白粉；取上清液浓缩，醇沉，醇洗，真空冷冻干燥，得川明参碱提多糖。所剩固体残渣用蒸馏水提取可得川明参水提多糖。 

本发明优选的川明参蛋白和多糖制备条件为： 

川明参粉按液料比20:1加碱溶液（用氢氧化钠调pH12.5），超声提取，离心，二次超声提取，合并上清液，用盐酸调pH至2.0沉淀蛋白，离心得沉淀物A和上清液B，取A，用95%乙醇洗涤2次，再用超纯水洗，调pH7.0，300Pa，-70℃冷冻干燥，川明参蛋白粉。取B减压浓缩至原体积1/4，加无水乙醇至含醇量80%，4℃静置过夜使沉淀析出，离心，沉淀用乙醇洗涤3次，300Pa，-70℃冷冻干燥，得川明参碱提多糖。

超声波辅助同步提取川明参蛋白和多糖的最佳条件为：超声功率225W、超声时间38min、液料比20:1、超声温度49℃。 

蛋白含量的测定采用考马斯亮蓝染色法。蛋白提取率采用公式（1）计算： 

蛋白提取率Ｙ₁（%）＝（蛋白干品质量×干品蛋白纯度/原料质量）×100％  （1）

多糖含量的测定采用苯酚-硫酸法以葡萄糖为标准品制作标准曲线测定多糖含量。多糖提取率采用公式（2）计算：

多糖提取率Ｙ₂（%）＝（多糖干品质量×干品多糖纯度/原料质量）×100％   （2）

采用本发明所述的方法，川明参蛋白和多糖提取率分别为（2.42±0.84）%和（25.92±0.67）%。本方法具有提取时间短，操作简单，生产成本低的优点。

发明内容

图1川明参蛋白等电点的确定