[发明专利]一株高耐性酵母菌株及其构建方法有效
| 申请号： | 201410277435.0 | 申请日： | 2014-06-20 |
| 公开（公告）号： | CN104017742B | 公开（公告）日： | 2017-12-19 |
| 发明（设计）人： | 张翠英;肖冬光;林雪;董健;柏晓雯;宋海岩 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/63;A21D8/04;C12R1/865 |
| 代理公司： | 北京鼎佳达知识产权代理事务所(普通合伙)11348 | 代理人： | 王伟锋 |
| 地址： | 300457 天津市滨*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一株高 耐性 酵母 菌株 及其 构建 方法 | ||
1.一株耐高温、耐高糖、耐冷冻的高耐性酵母菌株，是在酵母出发菌株中过表达H/ACA小核仁RNA的编码基因SNR84获得；
所述出发菌株为面包酵母(Saccharomyces cerevisiae)CICC31616。
2.如权利要求1所述的一株耐高温、耐高糖、耐冷冻的高耐性酵母菌株，其特征在于，所述SNR84基因其Gene ID为：9164879，核苷酸序列如核苷酸序列表中SEQ NO:1所示。
3.一株高耐性酵母菌株的制备方法，包括以下步骤：
(1)以面包酵母CICC31616总DNA为模板，PCR扩增SNR84基因；
(2)将PCR产物连接到含有PGK1强启动子的质粒上，获得重组质粒1；
(3)以重组质粒1为模板，通过PCR扩增获得SNR84基因和强启动子的连接片段；
(4)将步骤(3)获得的片段连接到带有KanMX抗性的载体上，得到重组质粒2；
(5)将步骤(4)获得的重组质粒2导入出发酵母菌株CICC31616中，获得重组菌株。
4.如权利要求3所述的一株高耐性酵母菌株的制备方法，其特征在于，所述含有PGK1强启动子的质粒为pUC质粒。
5.如权利要求4所述的一株高耐性酵母菌株的制备方法，其特征在于，所述带有KanMX抗性的载体为Yep352载体。
6.如权利要求3所述的一株高耐性酵母菌株的制备方法，其特征在于，所述重组质粒导入出发酵母菌株的方法为醋酸锂转化法。
7.如权利要求1所述的高耐性酵母菌株在面包生产中的应用。
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