[发明专利]利用抗生素厂废水培养扁圆卵形藻的培养基及培养方法在审

专利信息
申请号: 201410280628.1 申请日: 2014-06-23
公开(公告)号: CN104017732A 公开(公告)日: 2014-09-03
发明(设计)人: 王培磊 申请(专利权)人: 临沂大学
主分类号: C12N1/12 分类号: C12N1/12;C12R1/89
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 276000 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 利用 抗生素 废水 培养 扁圆 卵形 培养基 方法
【权利要求书】:

1.一种利用抗生素厂废水培养扁圆卵形藻的培养基,其特征在于配方如下: 

抗生素厂废水100毫升,氟硅酸钠0.5毫克,猪粪浸出液2毫升,鸭粪浸出液1.2毫升,f/2维生素溶液1毫升,f/2微量元素1毫升,硬脂酸镁1毫克,甲硫氨酸0.2毫克;土壤浸出液1.4毫升,海泥浸出液1.6毫升,L-精氨酸0.5毫克,硝酸铵20毫克,尿素3毫克,氯化铵8毫克,磷酸二氢钾6毫克,麦饭石粉6毫克,920植物生长刺激素6国际单位,钛溶液1毫升,酵母浸粉8毫克,脱氧胆酸钠4毫克,山梨醇10毫克,甘露醇4毫克,羧甲基纤维素钠2毫克,海藻酸丙二醇酯3毫克,胰蛋白6毫克,过磷酸钙5毫克,三羟甲基氨基甲烷0.5毫克,天冬氨酸0.4毫克,异亮氨酸0.2毫克,臭氧消毒后的纯净海水1000毫升。 

2.一种利用抗生素厂废水培养扁圆卵形藻的方法,其特征在于具体步骤如下: 

培养容器为20升蒸馏水桶,该桶普通化学实验室和生物实验室均有且市场有售,高密度聚乙烯材料制成,无色或白色,有较好的透光性,以利藻类进行光合作用,靠近底部有一水龙头,水桶顶部右上角有一圆形盖子,上有旋丝,可旋转而密封,盖子打上2个孔,一个孔插入充气管,另一个孔插入排气管,充气管和排气管都是玻璃管,内径6毫米,将蒸馏水桶洗刷干净,后用蒸馏水润洗3遍,装入权利要求1所述的培养基12升,充气混合5分钟,选择生命力旺盛、无污染的扁圆卵形藻接种,接种密度6×104cell/mL,盖子上插入两根干净玻璃管,一根较长,35厘米,顶端露出盖子15厘米,下端通过料管与散气石连接,用以充气(散气石的作用是形成很小的气泡,避免大气泡或翻滚的波浪打碎藻细胞),另一根较短,16厘米,两端露出盖子即可,用以排气,两根玻璃管同样粗细,用干净的透明胶带将两根玻璃管固定,长的玻璃管上端用料管与充气泵相连,充入混合气体,混合气体成分和体积比例是空气∶纯二氧化碳∶臭氧∶氨气=92%∶6%∶1%∶1%,连续充气,充气量不宜太大,以藻细胞浮起不下沉即可,室外培养,太阳光照射,最佳温度25±2℃,最佳光照强度5000-10000Lux,培养的前5天,水桶上方搭建一简易棚,上放置帘子遮挡光线,使光照强度维持在1500-2800Lux,避免强烈阳光对细胞造成的光伤害,第6天撤掉帘子,较强的光照有利于细胞的生长繁殖和高不饱和脂肪酸的合成,培养至第7天,停止充气,拿开盖子,补充新鲜培养基3升,以弥补蒸发掉的水分,盖上盖子,充气,继续培养,至第9天,扁圆卵形藻密度增加至450×104cell/mL,停止培养,从底部的水龙头放出藻液,将培养容器洗刷干净后,加入中药消毒液消毒30分钟,后进入下一轮培养。 

所述中药消毒液由以下重量比的物质组成:每100份85%乙醇中加入以下重量份的中药材:白屈菜20~50份、忍冬藤10~20份、桉树叶15~25份、栀子5~10份、甘草5~15份,防腐辅料1-3份;中药消毒液制作方法:将新鲜白屈菜、忍冬藤、桉树叶、甘草、山栀果切碎, 于60-70℃下烘干,再用中药材粉碎机分别粉碎至80目备用,用托盘天平分别称取烘干并粉碎的白屈菜120克,忍冬藤60克,桉树叶叶60克,甘草30克,山栀果30克,防腐辅料6克,置于三角烧瓶中充分混合后,加入1000毫升85%乙醇,浸泡48小时,200筛绢过滤,将清液静置沉淀32-36小时,撇去液面漂浮物,取中上层的清液,即为复方中药消毒液,密封于黑色试剂瓶中,贴上标签,置于4℃冰箱备用。 

3.根据权利要求2所述的一种利用抗生素厂废水培养扁圆卵形藻的方法,其特征在于,对选用的所述的反应器,洗刷干净后进行消毒,使用紫外灯消毒,消毒10-20分钟。 

4.根据权利要求2所述的一种利用抗生素厂废水培养扁圆卵形藻的方法,其特征在于,对选用的所述的反应器,洗刷干净后进行消毒,使用高压氮气喷射消毒,消毒5-10分钟。 

5.根据权利要求2所述的一种利用抗生素厂废水培养扁圆卵形藻的方法,其特征在于,对选用的所述的反应器,洗刷干净后进行消毒,使用高压二氧化碳喷射消毒,消毒5-6分钟。 

6.根据权利要求2所述的一种利用抗生素厂废水培养扁圆卵形藻的方法,其特征在于,对选用的所述的反应器,洗刷干净后分两个阶段消毒,先使用高压氮气喷射消毒,消毒2-3分钟,使用高压二氧化碳喷射消毒,消毒2-3分钟,消毒完毕后再进行藻类培养。 

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