[发明专利]金霉素效价的高通量测定方法在审
申请号: | 201410283976.4 | 申请日: | 2014-06-24 |
公开(公告)号: | CN104198418A | 公开(公告)日: | 2014-12-10 |
发明(设计)人: | 吴新芝 | 申请(专利权)人: | 浦城正大生化有限公司 |
主分类号: | G01N21/33 | 分类号: | G01N21/33;G01N1/28 |
代理公司: | 广州市红荔专利代理有限公司 44214 | 代理人: | 张文 |
地址: | 353000 福建*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 金霉素 通量 测定 方法 | ||
1.金霉素效价的高通量测定方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1、金霉素标准溶液的制备:精密称取金霉素标准品适量,用0.01mol/l盐酸溶液溶解,并制成浓度分别为6u/ml、12u/ml、18u/ml、24u/ml、30u/ml的金霉素标准溶液;
步骤2、金霉素标准曲线的绘制:在波长267±1nm处,以0.01mol/l盐酸溶液作为空白溶液调节仪器零点,分别测定步骤1中所制得的各浓度溶液所对应的吸光度A,以吸光度A为横坐标,浓度C为纵坐标,作直线回归和相关性分析,并绘制标准曲线图表,要求:相关系数r≥ 0.999;
步骤3、金霉素样品发酵液的预处理:取适量体积待检测的样品发酵液,加入同样量5%草酸溶液进行振荡处理后,过滤;
步骤4、吸取步骤3中所得的滤液100ul至50ml容量瓶中,加入0.01mol/l盐酸溶液定容至刻度,摇匀;
步骤5、效价检测:以0.01mol/l盐酸溶液为参比溶液,在波长267±1nm处进行分光光度计校正后,直接测定步骤4中容量瓶中的溶液的吸光度;
步骤6、根据所测得的吸光度值,在步骤2中所制得标准曲线表上查得相应的浓度值,浓度值×1000=样品效价含量(u/ml)。
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